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和核酸多聚酶(-

时间:2022-03-29 理论教育 版权反馈
【摘要】:3.血液中发现HBV-DNA是乙肝病毒存在及有无复制能力的直接标志。在乙肝活动期,HBV-DNA一般均呈现阳性,病情越重,含量越高。目前临床对HBV-DNA可以做出定性和定量的检测。乙肝病毒在复制过程中离不开一种重要的酶,一种叫脱氧核糖核酸多聚酶的东西。它是乙肝病毒复制的“催化剂”,没有这种聚合酶的作用,乙肝病毒的复制就会停止。

乙型肝炎病毒(HBV)是嗜肝DNA病毒,HBV基因组英文缩写为HBVDNA,由3 200个碱基对组成。

上文提到,乙肝病毒是以复制的形式繁殖、传播的,在乙肝病毒的复制过程中,有两个很重要的因素:一个是模板,另一个是催化剂。没有这两个因素,乙肝病毒就不能复制。乙肝病毒的复制模板是乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)。乙肝病毒复制的“催化剂”就是乙肝病毒DNA 聚合酶,没有这种聚合酶的作用,乙肝病毒的复制就会停止。

(一)乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)

核酸是病毒的核心部分,乙肝病毒的复制是以核酸的DNA为模板进行复制的。

1.基因复制 乙肝病毒的基因(DNA)是由两条螺旋的DNA 链连成的一个环形结构。其中一条长链(分子生物学上称为负链)已经形成完整的环状;另一条长度较短的链(分子生物学上称为正链)呈半环状。在复制过程中,这条半环状的DNA 链就会以负链为模板,在催化剂──乙肝病毒DNA聚合酶的作用下延长,最终形成完整的环状。这时的乙肝病毒基因就形成了一个完全环状的双股DNA。我们把这种DNA称作共价闭合环状DNA(即cccDNA),可以把它看作是病毒复制的原始模板。模板形成后,病毒基因会以其中的一条cccDNA为模板,利用肝细胞基因中的酶和DNA聚合酶的“催化”,一段基因又一段基因地复制,形成负链和正链。最后再装配到一起形成新的乙肝病毒DNA颗粒。

2.共价闭合环状DNA(cccDNA) cccDNA是一个完全环状的双股螺旋结构,结构非常稳定,难以破坏。乙肝病毒的基因复制是以cccDNA为模板的,cccDNA是乙肝病毒复制中重要的中间产物,一旦它在肝细胞核内形成,就具有了高度的稳定性,可长期存在于肝细胞内,不但起着上述的“模板”作用,而且还像深深扎根在泥土里的野草一样很难完全清除,所以有人把它称为“超螺旋结构”。不论用什么抗病毒药物,不论细胞内的DNA受到多大的抑制,也不论用药的时间有多久,都很难清除这种cccDNA。只要肝细胞内有很少量的cccDNA,当停药后,核内的cccDNA又可以再次成为病毒复制的“模板”,继续复制乙肝病毒的DNA,这也是乙肝很难根治的原因。

3.血液中发现HBV-DNA是乙肝病毒存在及有无复制能力的直接标志。在乙肝活动期,HBV-DNA一般均呈现阳性,病情越重,含量越高。目前临床对HBV-DNA可以做出定性和定量的检测。HBV-DNA含量还是使用某些药物(如干扰素、核苷类抗病毒药物等)和判断疗效的依据之一,药物有效,病毒复制受到明显抑制的话,HBV-DNA含量就会明显下降,甚至转阴。

(二)脱氧核糖核酸多聚酶(DNA-P)

乙肝病毒在复制过程中离不开一种重要的酶,一种叫脱氧核糖核酸多聚酶(DNA-P)的东西。它是乙肝病毒复制的“催化剂”,没有这种聚合酶的作用,乙肝病毒的复制就会停止。因此它也是乙肝病毒存在的直接依据,它也可以反映乙肝病毒的复制水平,它的活性可以较好地反映血液中乙肝病毒的含量,DNA-P正常值< 25 CPm。

DNA-P还是评价抗乙肝病毒药物是否有效的重要指标,大多数核苷类抗病毒药物如拉米夫定、阿德福韦、恩替卡韦等作用靶点就是DNA-P,用药有效后,DNA-P活性迅速下降,乙肝病毒的复制受到抑制。

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