实验室环境和人体表面微生物的检查

实验三　实验室环境和人体表面微生物的检查

一、目的要求

1.证明实验室环境与体表存在着微生物。

2.比较来自不同场所与不同条件下的细菌数量和类型。

3.观察不同类群微生物的菌落形态特征。

4.体会无菌操作的重要性。

二、基本原理

平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分，当取自不同来源的样品接种于培养基上，在适宜温度下培养1～2天，每一种菌体即能通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个可见的细胞群体的集落，称为菌落。每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点，例如菌落的大小，表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑，边缘整齐或不整齐，菌落透明或不透明或半透明，颜色的不同以及质地疏松或紧密等。因此，可通过平板培养来检查环境中细菌的数量和类型。

三、器材

1.培养基:牛肉膏蛋白胨琼脂平板。

2.仪器及其他用具:无菌水，灭菌棉签（装在试管内），接种环，试管架，酒精灯，记号笔，废液缸。

四、操作步骤

1.写标签

在培养皿的底部写上班级、姓名、日期、样品来源。

2.实验室细菌检查

（1）空气

将一个平板放在当时做实验的实验室，打开皿盖，使琼脂表面暴露在空气中；将另一个平板放在无人走动的实验室，打开皿盖，放置1h后盖上皿盖。

（2）实验台和门的旋钮

取无菌棉签并用无菌水沾湿，在实验台或门旋钮上擦拭约2cm²的范围，将棉签在无菌操作的条件下，在平板上滚动接种。

3.人体细菌的检查

（1）手指（洗手前后）

首先，用未洗的手在琼脂表面来回划线，盖上皿盖，然后用肥皂洗手后，在另一个平板上来回划线，盖上皿盖。

（2）头发

揭开皿盖，用手将头发在平板上方用力摇动数次，使细菌降落到平板的表面，盖上皿盖。

（3）咳嗽

将去盖的平板放在离口6～8cm处，对着琼脂表面用力咳嗽，盖上皿盖。

（4）鼻腔

取无菌棉签，在鼻腔内滚动数次，接种于平板上。

4.将所有平板反转，30℃培养1～2天

5.结果记录

（1）菌落计数。

（2）观察菌落特征。

五、实验报告

1.结果

2.思考题

通过本实验，在防止培养物的污染和细菌的扩散方面，你学到些什么？有什么体会？