【摘要】：触发ES细胞分化为特定类型细胞的主要方法是利用悬浮培养聚集细胞。最初在EC细胞研究中建立了拟胚体分化技术。在拟胚体中，ES细胞的ICM／上胚层发育程序重新活化。检测标记基因的表达，可分离纯化谱系特异性细胞或终末分化细胞。
拟胚体的分化_分子医学导论
一、拟胚体的分化
目前，引导多能干细胞进入特定的发育途径，然后在体外支持分化表型的存活与成熟的手段还很局限，采用的方法也很不成熟。触发ES细胞分化为特定类型细胞的主要方法是利用悬浮培养聚集细胞。最初在EC细胞研究中建立了拟胚体分化技术。在拟胚体中，ES细胞的ICM／上胚层发育程序重新活化。细胞分化的方式与胚胎中相似，但缺乏适当的轴性组织或不能确立胚胎轮廓。每个拟胚体都能发育成多种分化细胞，如卵黄囊内胚层、心肌细胞、胚胎性的和成体的造血细胞、内皮细胞、骨骼肌细胞、脂肪细胞、神经元和神经胶质细胞等。添加维甲酸诱导，使细胞有利或不利于向某些类型细胞分化，但最终的培养物是各种细胞的混合物。
在拟胚体中，有多细胞相互作用的复杂背景，可用替代性的方法分离出感兴趣的细胞。如在含造血生长因子的半固体培养基中可选择性培养造血细胞。检测标记基因的表达，可分离纯化谱系特异性细胞或终末分化细胞。免疫纯化方法适用于分离具有表面标志的细胞，也可通过转基因方法导入药物抗性和（或）细胞分选标记分离特征性细胞。如将Sox－1调控绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）基因表达的载体导入ES细胞，分化为神经祖细胞时，通过特异性表达的GFP标记纯化细胞。
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