二十二、位点专一性重组和转座
1.用示意图简要说明λDNA整合进入宿主DNA中然后再解离出来的过程。
2.说明下列情况下活性酪氨酸切割DNA链并再接合的模型:(1)普通拓扑异构酶的活性酪氨酸;(2)Int拓扑异构酶的活性酪氨酸。
3.如何用实验证明Int蛋白具有拓扑异构酶活性?
4.如何用实验确定Int蛋白在attB上的切割位点?
5.如何用实验证明Int蛋白是通过磷酸化酪氨酸的连接与DNA相结合?如何确定是哪个酪氨酸参与这一过程。
6.图示解释DNA片段倒位是如何关闭沙门氏菌(Salmonella)一个鞭毛蛋白基因的表达,并启动另一个鞭毛蛋白基因的表达的。
7.通过示意图解释噬菌体Mu基因片段的倒位是如何关闭一个尾蛋白基因的表达,并启动另一个尾蛋白基因的表达的。
8.如何用实验证明细菌转座子中含有末端反向重复序列?
9.图示解释转座作用如何引起转座子两侧的宿主DNA产生同向重复。
10.比较细菌转座子IS1、Tn3、真核细胞的转座子Ac的遗传图谱。
11.设计一种实验方法可以追踪Tn3在质粒之间的转座现象。
12.画出示意图说明Tn3的转座机制,包括具体细节。
13.画出示意图说明保守性转座的机制。
14.为什么转座作用能产生斑点玉米。
15.画出抗体蛋白的结构示意图,并指出重链和轻链。
16.为什么几千个免疫球蛋白基因能产生数百万种抗体蛋白?
17.画出B淋巴细胞成熟时免疫球蛋白的重链、轻链基因发生重排的示意图。
18.为什么V(D)J连接信号能确保免疫球蛋白基因的各组分都能出现在成熟的重组基因当中?
19.图示一个设计的报告质粒,用于检测重组信号序列的七聚体/九聚体(heptamer/nonamer)以及间隔区的重要性,并解释为什么这个质粒可以检测重组。
20.请简述免疫球蛋白基因重组信号序列的DNA链被切割并再接合的分子模型。这一机制对于抗体多样性的产生有何意义?
21.如何用实验证明在体外对免疫球蛋白基因的重组信号序列的切割会导致发卡结构的产生?
22.列出证据说明逆转病毒粒子的逆转录酶活性,以及RNA酶在逆转录活性中的作用。
23.如何用实验证明逆转病毒中的强终止反转录子与RNA基因组形成碱基配对,并且它与RNA引物是共价连接的。
24.LTRs在逆转病毒基因组RNA中和前病毒中的结构有什么不同?
25.图示说明逆转病毒基因组RNA转变为前病毒的过程,并解释LRTs在两者中的结构有什么不同。
26.比较逆转病毒的复制机制和反转座子的转座机制。
27.列举证据说明反转座子通过RNA中间体进行转座。
28.如何用实验证明类LINE元件的内切核酸酶能特异性地在靶DNA链上切开一个缺口?
29.如何用实验证明类LINE元件能将产生缺口的靶DNA链作为该元件反转录的引物?
30.请叙述类LINE元件的反转座作用的模型。
31.画图比较第二类内含子的retrohoming机制和反转座机制。
32.设计一个实验方法检测第二类内含子的反转座,并解释实验如何证实是反转座而不是retrohoming?
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