激素对血糖浓度的调控作用

实验七　激素对血糖浓度的调控作用

【实验目的】

了解血糖浓度测定方法，验证激素对血糖浓度的调节作用。

【实验原理】

激素是调节血糖浓度恒定的重要因素，其中胰岛素起降低血糖的作用，肾上腺素起升高血糖的作用。将实验动物——家兔进行空腹采血后，分别注射胰岛素和肾上腺素，作用一段时间后再分别采血，同时观察注射激素前后的家兔血糖浓度变化，以验证激素的调节作用。本实验测定血糖的方法采用葡萄糖氧化酶法。

葡萄糖氧化酶(GOD)将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢，后者在过氧化物酶(POD)和色素原性氧受体存在下，将过氧化氢分解为水和氧，同时使色素原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder反应。其色泽深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比。其反应式如下:

将各标本管与标准管的颜色深浅进行比较，就可判断各标本血糖浓度的高低，从而证明激素对血糖浓度的调节作用。

【实验试剂】

1．40单位/ml胰岛素注射液。

2．肾上腺素注射液(1∶1000)。

3．250 g/L葡萄糖溶液。

4．二甲苯及凡士林。

5．2500单位/ml肝素抗凝剂。

6．葡萄糖氧化酶试剂。

7．6．5 mmol/L葡萄糖标准应用液。

【实验器材】

1ml及10ml注射器、台式磅秤、兔固定箱、刀片、酒精棉球及干棉球、试管及试管架、0．5ml及5ml吸管、滴管、沸水浴。

【实验方法】

1．动物准备及空腹采血:取试管4支，编号为①、②、③、④，分别加入肝素抗凝剂0．01ml。取空腹家兔两只，分别编号1和2，过磅称重，记录体重。可用耳静脉采血法:先剪去耳静脉处毛，再用二甲苯擦拭兔耳部静脉，使其充血，在其周围抹上凡士林以防止溶血，用刀片纵行割破边缘耳静脉，放血入抗凝管①和②，约需2ml，边滴边摇，以防凝固。或者用兔心脏采血法:将10ml注射器用肝素抗凝剂淋洗后，置家兔于兔固定箱中，固定四肢，在心尖搏动处插入，采血3ml左右并加入抗凝管。

2．注射激素并再采血:将l号兔皮下注射已配制好的胰岛素稀释液(按1．5单位/kg计算稀释到1ml。观察兔子情况，40分钟后按上述方法采血并加入抗凝管③。继续观察半小时，如发生休克，立即注射250 g/L葡萄糖10ml。将2号兔注射1∶1000肾上腺素注射液(按0．37ml/kg稀释成1ml)，观察兔子情况。30分钟后，按同法采血入抗凝管④中。将收集的4管血液置离心机离心10分钟(2000 r/min)，取上层血浆，分别制成胰前①、胰后③、肾前②、肾后④4个标本管。

3．血糖定性观察:取干净试管6支，按表5-9操作加入各试剂。混匀各管，置沸水浴中8分钟，取出，观察各管颜色的深浅。将各管与标准管比较颜色深浅，得出定性结论，并将实验结果记录下来，加以解释。

表5-9　　　　　　　激素对血糖浓度影响实验

【思考题】

胰岛素和肾上腺素分别对血糖浓度有何调节作用?