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细胞学分型技术

时间:2022-05-13 理论教育 版权反馈
【摘要】:人类主要组织相容性抗原系统中的D区抗原,在免疫识别、疾病关联和器官移植中发挥重要作用,一般用细胞学分型方法检测其相应的基因产物。①混合淋巴细胞培养技术;②纯合细胞分型方法阴性分型技术;③预处理淋巴细胞分型技术阳性分型技术。MLC是研究细胞免疫反应,尤其是移植免疫的较好的体外模型,不仅用于HLA-D分型,且广泛应用于器官移植前的组织配型。PLT阳性分型技术是根据二次应答能特异性识别预处理细胞的特性而建立的。

第二节 细胞学分型技术

人类主要组织相容性抗原(HLA)系统中的D区抗原,在免疫识别、疾病关联和器官移植中发挥重要作用,一般用细胞学分型方法检测其相应的基因产物。常用于检测HLA-D区基因产物的方法有三种。①混合淋巴细胞培养(mixed lymphocyte cultura,MLC)技术;②纯合细胞分型方法(homozygous typing cell,HTC)阴性分型技术;③预处理淋巴细胞分型技术(primed lymphocyte typing,PLT)阳性分型技术。

一、MLC技术

MLC是研究细胞免疫反应,尤其是移植免疫的较好的体外模型,不仅用于HLA-D分型,且广泛应用于器官移植前的组织配型。最常用的方法有双向MLC方法和单向MLC方法。

二、HTC阴性分型技术

用已知抗原的HTC作为刺激细胞,带有未知抗原的受检细胞作为应答细胞,在HTC刺激细胞与受检应答细胞组成的单向混合淋巴细胞培养中,如果细胞发生反应,说明受检细胞不具有与HTC相同的抗原;如果细胞不发生反应,则说明受检细胞具有与HTC相同的抗原,从而不能识别HTC的抗原,受检细胞可能为含HTC带有的抗原的纯合子或杂合子。

三、PLT阳性分型技术

PLT阳性分型技术是根据二次应答能特异性识别预处理细胞的特性而建立的。应答细胞与刺激细胞初次培养9~12d后,应答细胞增殖为淋巴细胞后又回到处于休止状态的小淋巴细胞,即为预处理淋巴细胞(PL细胞)。当PL细胞与初次反应中的刺激细胞再次进行MLC时,在20~24h内将产生很高的应答反应,刺激细胞在此过程中成为预处理作用细胞。

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