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血清白蛋白测定(溴甲酚绿法)

时间:2022-05-13 理论教育 版权反馈
【摘要】:2.掌握血清白蛋白的测定方法及721分光光度计或AT-648半自动生化多用仪的使用方法和现代生化检测试剂盒的应用。在具有表面活性剂的酸性环境中,血清中的白蛋白和溴甲酚绿结合,形成绿色。最高吸收峰628nm,颜色强度与样品中白蛋白浓度成正比。3.于721分光光度计/AT-648半自动生化分析仪上628nm处比色,以空白管校正吸光度为零,读取各管吸光度值A。

实验十三 血清白蛋白测定(溴甲酚绿法)

一、实验目的与要求

1.了解血清白蛋白(albumin)在人体营养学上的意义及其生理学上的重要性。

2.掌握血清白蛋白的测定方法及721分光光度计或AT-648半自动生化多用仪的使用方法和现代生化检测试剂盒的应用。

二、实验原理

在具有表面活性剂的酸性环境中,血清中的白蛋白和溴甲酚绿结合,形成绿色。最高吸收峰628nm,颜色强度与样品中白蛋白浓度成正比。

三、实验仪器与试剂

1.仪器

(1)AT-648半自动生化分析仪1台;

(2)四孔恒温水浴锅1个;

(3)振动摇床1台。

2.分组与仪器 2人一组,每组仪器包括:

(1)试管架1个;

(2)2ml试管10个;

(3)可调微量加样器1个;

(4)1ml移液管1个;

(5)洗耳球1个;

(6)搪瓷盘1个;

(7)微量加样滴头;

(8)吸水纸。

3.本试剂盒内含2种试剂:

(1)溴甲酚绿试剂100ml×3瓶;

(2)白蛋白标准液1ml×1瓶(45.3g/L)。

四、实验步骤

1.于一系列试管中,按下表加入各溶液:

表13-1 系列反应管中所加溶液的量

img57

2.以上各管充分混匀,室温放置10min。

3.于721分光光度计/AT-648半自动生化分析仪上628nm处比色,以空白管校正吸光度为零,读取各管吸光度值A。

五、实验结果与分析

img58

线性范围:在0~60g/L范围内线性良好。

六、实验报告

参照《营养学》、《生物化学》原理分析。

七、注意事项

1.试剂为空白对照;

2.每组样品做2~3个平行;

3.正常参考范围:55~75g/L。

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