【摘要】:2.掌握血清白蛋白的测定方法及721分光光度计或AT-648半自动生化多用仪的使用方法和现代生化检测试剂盒的应用。在具有表面活性剂的酸性环境中,血清中的白蛋白和溴甲酚绿结合,形成绿色。最高吸收峰628nm,颜色强度与样品中白蛋白浓度成正比。3.于721分光光度计/AT-648半自动生化分析仪上628nm处比色,以空白管校正吸光度为零,读取各管吸光度值A。
实验十三 血清白蛋白测定(溴甲酚绿法)
一、实验目的与要求
1.了解血清白蛋白(albumin)在人体营养学上的意义及其生理学上的重要性。
2.掌握血清白蛋白的测定方法及721分光光度计或AT-648半自动生化多用仪的使用方法和现代生化检测试剂盒的应用。
二、实验原理
在具有表面活性剂的酸性环境中,血清中的白蛋白和溴甲酚绿结合,形成绿色。最高吸收峰628nm,颜色强度与样品中白蛋白浓度成正比。
三、实验仪器与试剂
1.仪器
(1)AT-648半自动生化分析仪1台;
(2)四孔恒温水浴锅1个;
(3)振动摇床1台。
2.分组与仪器 2人一组,每组仪器包括:
(1)试管架1个;
(2)2ml试管10个;
(3)可调微量加样器1个;
(4)1ml移液管1个;
(5)洗耳球1个;
(6)搪瓷盘1个;
(7)微量加样滴头;
(8)吸水纸。
3.本试剂盒内含2种试剂:
(1)溴甲酚绿试剂100ml×3瓶;
(2)白蛋白标准液1ml×1瓶(45.3g/L)。
四、实验步骤
1.于一系列试管中,按下表加入各溶液:
表13-1 系列反应管中所加溶液的量
2.以上各管充分混匀,室温放置10min。
3.于721分光光度计/AT-648半自动生化分析仪上628nm处比色,以空白管校正吸光度为零,读取各管吸光度值A。
五、实验结果与分析
线性范围:在0~60g/L范围内线性良好。
六、实验报告
参照《营养学》、《生物化学》原理分析。
七、注意事项
1.试剂为空白对照;
2.每组样品做2~3个平行;
3.正常参考范围:55~75g/L。
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