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菌株保存方法

时间:2022-05-11 理论教育 版权反馈
【摘要】:1.培养基直接保存法为常用的菌种短期保存方法 ,此法操作方便,但易发生变异。作为抗菌药物敏感试验质控用的参考菌株,由保存状态取出后,不能连续使用一周以上,应定期传代,但一般不超过6次,要及时进行更换。3.冷冻干燥法此法保存菌种时间长,可以避免细菌因频繁传代而造成菌种污染、变异和死亡,是菌种保存的最佳方法 ,适用于需要长期保存的菌株。

二、菌株保存方法 

1.培养基直接保存法为常用的菌种短期保存方法 ,此法操作方便,但易发生变异。营养要求不高的细菌,可用半固体保存法,一般2~3个月转种一次,特殊培养要求的细菌(如流感嗜血杆菌),可接种巧克力琼脂斜面,密封后于4℃冰箱储存,每两星期转种一次。淋病奈瑟菌保存于巧克力琼脂,每天或每隔一天转种一次,因对低温敏感,故不宜以4℃冰箱保存。

需注意的是,保存菌株所选用的培养基必须能使微生物长期维持生存与稳定,不能用含有可发酵糖的培养基,不可使用选择性培养基,不可使培养基干枯,保存容器要密封、安全。作为抗菌药物敏感试验质控用的参考菌株,由保存状态取出后,不能连续使用一周以上,应定期传代,但一般不超过6次,要及时进行更换。

2.快速冷冻法将细菌在液体培养基中增菌后,取数环新鲜菌液加入含小牛血清或脱纤维绵羊血的培养基内,制成浓菌悬液,再放入无菌玻璃珠,将此瓶放入-30℃以下低温冰箱保存。需要时用无菌镊子取出一粒玻璃珠置增菌培养液中,增菌培养后即可获得新鲜菌种。此法可使大部分细菌保存6~12个月,甚至更长时间。

3.冷冻干燥法此法保存菌种时间长,可以避免细菌因频繁传代而造成菌种污染、变异和死亡,是菌种保存的最佳方法 ,适用于需要长期保存的菌株。此法需冷冻干燥设备,操作较费时。

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