大白鼠急性炎症的渗出现象观察

第二节　大白鼠急性炎症的渗出现象观察

实验目的

观察急性炎症时的渗出现象。

实验原理

炎症反应最重要的功能是将炎症细胞输送至炎症病灶，白细胞渗出是炎症反应最重要的特征。白细胞的渗出过程是复杂的连续过程，包括白细胞边集和滚动、黏附和游出、在组织中游走等过程，并在趋化因子的作用下到达炎症灶，在局部发挥重要的防御作用（图7-4）。

图7-4　炎症反应时血流动力学变化模式图

实验对象及相关用品

1.实验对象

大白鼠。

2.实验相关用品

显微镜，10mL及5mL注射器各1支，常规手术器械一套，20%乌拉坦，1%角叉菜胶，生理盐水，细胞计数板，白细胞稀释液（2%冰醋酸或1%盐酸，裂解红细胞的作用），生化分析仪，1mLEP管若干，微量移液器。

实验分组

实验分两组，包括实验组与对照组。

观测指标

渗出液定量，颜色，透明度，凝固性，蛋白定量试验，细胞计数。

实验步骤

（1）取大白鼠用20%乌拉坦0.5mL/100g腹腔内注射麻醉。

（2）仰卧位固定后，于剑突右侧1cm处剪毛，实验组将0.5mL的无菌1%角叉菜胶生理盐水注入大鼠右胸腔内，引起角叉菜胶胸膜炎；对照组将0.5mL灭菌生理盐水注入大鼠右胸腔内。

（3）8～12h后，分别断头处死实验组与对照组动物，打开胸腔，用注射器抽取渗出液，测定液体量，分别观察两组液体颜色、透明度、凝固性。

（4）取一支EP管，用微量移液器准确加入0.38mL白细胞稀释液，加入20μL胸腔抽取液，混匀后将稀释液滴入计数室内静置3min，显微镜下计数四大格内的白细胞数。计算渗出液中的白细胞，四大格白细胞总数乘以50，即为每毫升抽取液中的白细胞数。

（5）最后利用生化分析仪测定各组胸腔抽取液中蛋白含量。

注意事项

（1）宜选择稍大些的大白鼠。

（2）手术过程要注意无菌操作，以免对照组右侧胸腔出现炎症。

（3）正确使用微量移液器，移液量要准确无误。

（4）掌握正确的细胞计数方法，做到各组计数准确。

实验报告要点

除注意实验报告的正规书写格式外，要求根据所学理论知识，阐明各组间不同现象的发生机制。

思考题

1.致炎剂角叉菜胶可以引起局部炎症，比较两组实验结果，阐述致炎后胸腔抽取液成分发生何种变化。

2.根据所学理论，解释上述变化的发生机制。