蟾蜍肠系膜急性炎症时血液循环观察

第一节　蟾蜍肠系膜急性炎症时血液循环观察

实验目的

利用蟾蜍肠系膜炎症模型，旨在观察急性炎症时微循环的改变，要求了解微循环各组成部分的结构与血流特点，掌握蛙肠系膜血液循环活体观察技术。

实验原理

急性炎症时的三大变化为：血流动力学改变、血管通透性增加和白细胞渗出。

微循环一词是指微动脉与微静脉之间的血液循环，是循环系统最基本的结构，是血液与组织进行物质交换的最小功能单位，典型的微循环由微动脉、后微动脉、毛细血管前括约肌、真毛细血管网、通血毛细血管、动静脉吻合支及微静脉等七部分组成。小动脉管壁相对较厚，血流速度快，血流由主干流向分支，可见轴流（血细胞在血管中央流动）现象；小静脉则壁薄，血液流速慢，血流由分支流向主干，无轴流现象；而毛细血管因管径仅6～8μm，只允许单个血细胞依次通过，故可以清晰的观察血细胞的流动情况。

蟾蜍肠系膜是观察炎症和微循环变化的良好标本，盐酸作为一种化学性刺激因素，对组织细胞具有强烈的刺激作用，可以引起蟾蜍肠系膜的急性非感染性炎症。

实验对象及相关用品

1.实验对象

蟾蜍。

2.实验相关用品

有孔蛙板、显微镜、常用手术器械、大头针、20%氨基甲酸乙酯（乌拉坦）、棉球、任氏液、0.01mol/L盐酸、1mL注射器。

实验分组

分为正常对照组和模型组。

观测指标

一般状态，肠系膜颜色；血管口径、血液流速、轴流现象的变化，毛细血管开放与否，细胞流态和白细胞黏附、游出的情况。

实验步骤

（l）取蟾蜍一只，20%氨基甲酸乙酯（乌拉坦）1～1.5mL/100g，进行皮下淋巴囊注射，10～15min后进入麻醉状态。

（2）将蟾蜍腹卧位固定于蛙板上，沿下腹部旁侧剪一长2～3cm的切口。

（3）用镊子轻轻拉出一小段小肠袢，将肠袢展开，用大头针固定铺在有孔的蛙板上（图7-1）。特别注意要轻轻拉动肠袢，避免术中出血。同时为避免肠系膜干燥，影响血液循环，需经常以35℃任氏液湿润，但不宜过多。

图7-1　蛙肠系膜固定方法

（4）将有孔蛙板置于显微镜的载物台上，使置有肠系膜的蛙板大孔对准接物镜，在低倍镜下观察血液循环，区别小动脉、小静脉及毛细血管。观察血管口径、血流速度及血流情况，区别轴流（血球层）及边流（血浆层）（图7-2）。

（5）吸干肠系膜表面任氏液，用1mL注射器在肠系膜上滴几滴0.01mol/L盐酸，继续观察血液循环的变化，观察血管口径、血流速度、轴流边流的界限变化，白细胞的附壁现象（图7-3）。

图7-2　蛙肠系膜正常血液循环示意图

图7-3　白细胞附壁现象

注意事项

（1）宜选择稍大些的蟾蜍。

（2）手术操作要仔细，大头针固定肠系膜时避免刺破毛细血管，出血造成视野模糊不清，影响观察效果。

（3）术中牵拉肠系膜时，切忌拉的过紧或撕破肠系膜，以免影响血液循环。

（4）在急性炎症造模前，为防止干燥要经常以任氏液湿润肠系膜。

（5）观察微循环时，要分清小动脉、小静脉及毛细血管。

实验报告要点

除注意实验报告的正规书写格式外，要求根据所学理论知识，阐述各种现象的发生机制。

思考题

1.不同血管的形态及血流特点如何与生理机能相适应？

2.盐酸可引起局部急性炎症反应，根据你的实验结果，说明局部炎症反应时微循环的变化特点？有何作用？