中药鉴定的方法

中药鉴定常用的鉴定方法有：来源鉴定法、性状鉴定法、显微鉴定法、理化鉴定法以及近年发展起来的生物鉴定法和指纹图谱鉴定法等。

（一）来源鉴定法

又称基原鉴定法，是应用植（动、矿）物分类学的知识，对中药的来源进行鉴定，确定其正确的学名，以保证中药的品种准确无误。来源鉴定的内容包括原植（动）物的科名、植（动）物名、拉丁学名、药用部位，矿物药的类、族、矿石名或岩石名。原植物鉴定的步骤包括：①观察植物形态；②核对文献；③核对标本。

（二）性状鉴定法

即用眼看、手摸、鼻闻、口尝、水试、火试等十分简便的方法来鉴别药材的外观性状，这些方法在我国医药学宝库中积累了丰富的传统鉴别经验，具有简单、易行、迅速的特点。性状鉴定的内容包括形状、大小、色泽、表面特征、质地、断面特征、气、味、水试、火试等（2011年）。

1．药材

（1）形状：药材的形状与药用部位有关，每种药材的形状一般比较固定。有些药材还有一些经验鉴别术语，如党参根头部分称为“狮子头”，款冬花形如“火炬头”，海马外形为“马头蛇尾瓦楞身”等。

（2）大小：指药材的长短、粗细（直径）和厚度。

（3）色泽：药材的颜色与其成分有关，每种药材常有自己特定的颜色，如丹参色红、黄连色黄、紫草色紫、熟地黄色黑等。颜色是否符合要求，是衡量药材质量好坏的重要标准之一。如用两种色调复合描述色泽时，应以后一种色调为主色。

（4）表面特征：指药材表面是光滑还是粗糙，有无皱纹、皮孔、鳞片、毛茸或其他附属物及有无节等。如白芥子表面光滑，紫苏子表面有网状纹理，海桐皮表面有钉刺，合欢皮的皮孔棕红色、椭圆形，辛夷（望春花）苞皮外表面密被灰白色或灰绿色有光泽的长茸毛，均为其重要鉴别特征。

（5）质地：指药材的轻重、软硬、坚韧、疏松（或松泡）、致密、黏性、粉性、油润、角质、绵性、柴性等特征。有的药材因加工方法不同，质地也不一样，经蒸、煮加工的药材，常质地坚实，半透明，呈角质状；富含淀粉者，晒干后质地常显粉性（2009年）。

（6）断面特征：包括自然折断面和横切面。折断面特征指药材折断时的现象，如是否容易折断，有无声响，有无粉尘散落及折断时断面的特征，如断面是否平坦，或显纤维性、颗粒性、裂片状，有无胶丝，是否可以层层剥离，有无射线纹理等。横切面的经验鉴定术语很多，如“菊花心”是指药材横切面上维管束与不甚直的射线排列成细密的放射状纹理，且在皮部沿射线常有裂隙，形如开放的菊花，如黄芪、（2008年）甘草等；“车轮纹”是指药材横切面上维管束与较宽而直的射线排列成稀疏整齐的放射状纹理，形如木质车辐，如防己（2008年）等；茅苍术有“朱砂点”等；还有一些属于异常构造的，如大黄的“星点”，何首乌的“云锦花纹”（2008年），商陆的“罗盘纹”（2008，2009年）等。

（7）气：有些药材有特殊的香气或臭气，如阿魏具强烈的蒜样臭气，檀香、麝香有特异芳香气，白鲜皮有羊膻气（2008，2012年）等，这是由于药材含有挥发性物质的缘故，也是药材的重要鉴定特征之一。

（8）味：药材的味感是由其所含的化学成分决定的，每种药材的味感是比较固定的，如乌梅、木瓜均以味酸为好，黄连、黄柏以味苦为好，甘草、党参以味甜为好等。味感也是衡量药材品质的标准之一。检查味感时，可取少量有代表性的药材在口里咀嚼约1min，使舌面各部位都接触到药液，或用开水浸泡后尝浸出液。有毒的药材需尝味时，取样要少，尝后应立即吐出漱口，洗手，以免中毒。

（9）水试：利用某些药材在水中产生的各种特殊的变化来鉴别药材，如沉浮、溶解情况、颜色、透明度、有无黏性、膨胀度、旋转与否及有无荧光等。如红花加水浸泡后，水液染成金黄色，药材不变色；秦皮水浸，浸出液在日光下显碧蓝色荧光；（2009，2010，2011年）苏木投热水中，水显鲜艳的桃红色；来源于旌节花属植物的小通草遇水表面显黏性；熊胆粉末投入清水杯中，即在水面旋转并呈现黄线下沉而短时间内不扩散；（2010年）哈蟆油用温水浸泡，膨胀系数不低于55等，这些现象与药材中所含的化学成分或组织构造密切相关。

（10）火试：有些药材用火烧之，能产生特殊的香气或臭气，会有颜色、烟雾、闪光或响声等现象出现，可据此鉴别其真伪甚至优劣。如麝香少许用火烧时有轻微的爆鸣声，起油点似珠，浓香四溢，灰烬白色；海金沙易点燃并产生爆鸣声及闪光，（2009，2011年）而松花粉和蒲黄无此现象，可资鉴别。

2．饮片

（1）形状：根及根茎、木本茎类饮片大多为类圆形或椭圆形切片，如甘草、大血藤的饮片；草本茎多为段状，圆柱形的如金钱草饮片，方柱形的如薄荷饮片，中空而节明显的如淡竹叶饮片。皮类饮片常为弯曲或卷曲的条片状，如肉桂、厚朴的饮片。叶类饮片一般为丝条状，如枇杷叶饮片；或保持原形，如番泻叶饮片；或皱缩，如艾叶饮片；或碎片状，如桑叶饮片。果实、种子类饮片一般为类圆球形，如五味子饮片；扁圆形如酸枣仁饮片；心形如苦杏仁饮片等；大者切成月牙形或类圆形片状，如木瓜、槟榔的饮片。

（2）大小：《中国药典》2010年版一部规定，饮片的规格有片、段、块、丝等。其厚薄大小通常为：①极薄片0．5mm以下，薄片1～2mm，厚片2～4mm。②短段5～10mm，长段10～15mm。③块为8～12mm的方块。④细丝宽2～3mm，宽丝宽5～10mm。

（3）表面：表面是饮片最具鉴别特征的地方，切片的饮片可分为外表面和切面。

①外表面：有的饮片外表面较为光滑；有的较为粗糙，有时呈鳞片状剥落，如苦参的饮片；根茎类饮片，如黄连、石菖蒲、香附等的饮片外表面有环状横纹、须根、鳞叶残痕。

②切面：饮片的切面大多为横切面。

a．双子叶植物根、根茎、茎有环状形成层和放射状环列的维管束，饮片切面显环纹和放射状纹理，如丹参、羌活的饮片；放射状纹理的密、疏形成了“菊花心”，如黄芪、甘草的饮片，或“车轮纹”，如防己、大血藤的饮片。黄芪、板蓝根、桔梗的饮片切面皮部白色，木部黄色，习称“金井玉栏”。

b．单子叶植物根、根茎有环状内皮层，不具放射状纹理，中柱小或维管束散列，饮片切面中心显小木心，如麦冬饮片，或散在的筋脉点，如莪术饮片。

c．双子叶植物根茎、单子叶植物根切面中央具髓，如黄连、天冬的饮片，而双子叶植物根、单子叶植物根茎切面中央一般无髓，如桔梗、知母的饮片。

d．有的饮片具异常构造，如牛膝、川牛膝的饮片切面显同心环状排列的筋脉点；商陆饮片由多层同心环构成“罗盘纹”；何首乌饮片皮部显“云锦状花纹”；大黄根茎饮片切面显“星点”。

e．蕨类植物根茎、叶柄基部的中柱有不同形状，如狗脊、绵马贯众的饮片叶柄基部分体中柱环列，紫萁贯众饮片叶柄基部中柱呈“U”字形。

f．木质藤本植物导管较粗大，饮片切面上显“针眼”，如川木通、鸡血藤的饮片。

g．树皮中韧皮部纤维束或石细胞群与薄壁组织相间排列，则皮类中药饮片显层状结构，如黄柏、秦皮的饮片。

h．分泌组织在切面上也是重要的识别特征，如人参、三七、西洋参具树脂道，饮片皮部具橙黄色小点；苍术具大型油室，饮片显“朱砂点”；鸡血藤具分泌细胞，饮片皮部有树脂样红棕色分泌物等。

（4）色泽：细胞中含有的成分不同，可使饮片外表面、切面有不同的颜色，如丹参饮片外表面红色，番泻叶饮片表面黄绿色，天花粉饮片切面白色，黄柏饮片切面鲜黄色，玄参饮片切面黑色，麻黄饮片切面有朱砂心，槟榔饮片切面具大理石样花纹。

（5）质地：常有硬、脆、韧、实、轻、重、松、粉、黏、角质等区分，这与饮片的组织结构、细胞中的后含物有一定关系。以薄壁组织为主，结构较疏松的饮片一般较脆或较松泡，如丹参、甘松、南沙参、生晒参的饮片；淀粉多的饮片呈粉性，如山药、半夏的饮片；含纤维多的饮片则韧性强，如桑白皮、葛根的饮片；含糖、黏液多的饮片一般黏性大，如黄精、地黄的饮片；富含淀粉、多糖成分的饮片经蒸煮糊化、干燥后呈角质状，如红参、延胡索、天麻的饮片。

（6）折断面：常有平坦、纤维性、颗粒性、分层、刺状、粉尘飞扬、海绵状、胶丝等，与细胞组织的结构、细胞中的后含物有密切关系。以薄壁组织、淀粉为主的饮片一般较平坦，如牡丹皮饮片；含纤维多的饮片具纤维性，如厚朴饮片；含石细胞多的饮片呈颗粒性，如木瓜饮片；纤维束或石细胞群与薄壁组织相间排列，即有硬韧部与软韧部之分，饮片常现层状裂隙，可层层剥离，如苦楝皮、黄柏的饮片；木类中药主要由木纤维组成，质硬，饮片折断面常呈刺状，如沉香、苏木的饮片；含淀粉多的饮片折断时粉尘飞扬，如山药、川贝母的饮片；含硬橡胶的饮片折断时有白色胶丝，如杜仲饮片。

（7）气：饮片的气味常因其含不同的化学成分而有所不同。木兰科、伞形科、唇形科、姜科等的中药饮片常因含挥发油，有明显而特殊的香气；五加科植物组织中具树脂道，如五加皮、人参的饮片；花类中药常具蜜腺和含挥发油，香气宜人；木类饮片大多有树脂及挥发油而有特殊香气，如沉香、檀香、降香的饮片；牡丹皮、徐长卿的饮片所含牡丹酚有特殊香气，香加皮饮片中的4-甲氧基水杨醛等成分具奶油话梅样香气（2010年）。气还与饮片的炮制方法、制用的辅料有关，如酒制的饮片有酒气，炒炭的饮片有焦香气等。

（8）味：常有酸、甜、苦、辣、咸、涩、淡等。木瓜、乌梅饮片含有机酸而味极酸；枸杞子含糖、甘草含甘草甜素而味甜；穿心莲含穿心莲内酯而味极苦；干姜含姜辣素而味辣；海藻饮片含钾盐而味咸；地榆、五倍子、槟榔的饮片含鞣质而味涩；五味子果肉味酸，种子味辛而微苦。味还与饮片的炮制方法有关。

（三）显微鉴定法

显微鉴定法是利用显微技术对中药进行显微分析，以确定其品种和质量的一种鉴定方法。适用于性状鉴定不易识别的药材、完整的、破碎的或粉末状药材以及含饮片粉末的各种中成药制剂的鉴定。显微鉴定主要包括组织鉴定和粉末鉴定，通过显微镜观察药材的组织构造、细胞形状以及内含物的特征，矿物的光学特性和利用显微化学方法确定细胞壁及细胞内含物的性质或某些品种有效成分在组织中的分布等，用以鉴别药材的真伪与纯度甚至品质，以及对中成药是否按处方规定投料进行鉴定。

1．显微制片方法

（1）横切面或纵切面制片：适用于完整的药材。

（2）表面制片：切取或撕取表皮制片。

（3）粉末制片：适用于完整的、破碎的、粉末状的各类药材、饮片及含饮片粉末的中成药。供试品粉末须过4号筛。

（4）解离组织片：使用化学试剂溶解细胞之间的胞间层，使细胞离散，以便观察细胞的完整形态。如供试品中薄壁组织占大部分，木化组织少或分散存在，可用氢氧化钾法（5%氢氧化钾溶液）；如果供试品质地坚硬，木化组织较多或集成较大群束，可用硝铬酸法（硝铬酸）或氯酸钾法（硝酸溶液、氯酸钾）（2008年）。

（5）花粉粒与孢子制片。

（6）磨片制片：适用于坚硬的矿物药、动物药。矿物药约厚0.03mm。

（7）含饮片粉末的中成药显微制片。

2．植物细胞壁和细胞后含物性质的鉴别

（1）细胞壁性质的鉴别

①木质化细胞壁：加间苯三酚试液和盐酸，显红色或紫红色（2009年）。

②木栓化或角质化细胞壁：加苏丹Ⅲ试液显橘红色至红色。

③纤维素细胞壁：加氯化锌碘试液，或先加碘试液再加硫酸溶液，显蓝色或紫色。

④硅质化细胞壁：加硫酸无变化。

（2）细胞后含物性质的鉴别

①淀粉粒：加碘试液，显蓝色或紫色；在偏光显微镜下，未糊化的淀粉粒显偏光现象，已糊化淀粉粒无偏光现象。

②糊粉粒：加碘试液，显棕色或黄棕色；加硝酸汞试液，显砖红色。

③脂肪油、挥发油或树脂：加苏丹Ⅲ试液，显橘红色、红色或紫红色；加90%乙醇，脂肪油和树脂不溶解（蓖麻油和巴豆油例外），挥发油则溶解。

④菊糖：加10% α-萘酚乙醇溶液，再加硫酸，显紫红色并很快溶解。

⑤黏液：加钌红试液，显红色。

⑥草酸钙结晶：加稀醋酸不溶解，加稀盐酸溶解而无气泡发生；加硫酸溶液，逐渐溶解，片刻后析出针状硫酸钙结晶。

⑦碳酸钙结晶（钟乳体）：加稀盐酸溶解，同时有气泡发生。

⑧硅质：加硫酸不溶解。

3．显微测量 在显微镜下测量细胞及细胞后含物等的大小，可用目镜测微尺。测量前目镜测微尺需先用载物台测微尺标化，计算出目微尺每小格在该物镜与目镜组合条件下所代表的长度（μm）。通常是在高倍物镜下进行测量，但欲测量较长的纤维、导管、非腺毛等的长度时，则在低倍物镜下测量，记录最大值与最小值。

4．显微临时制片常用封藏试液

（1）蒸馏水、稀甘油：适用于观察淀粉粒、油滴、树脂等细胞后含物及细胞壁的颜色。经水合氯醛透化的切片或粉末，加稀甘油1滴，可防止水合氯醛析出结晶，并使切片透明。

（2）甘油醋酸试液：使淀粉粒不膨胀变性，特别适宜淀粉粒的观察与显微测量。

（3）水合氯醛试液：为最常用的透化剂（2010，2011年）。可使皱缩的细胞膨胀，并可溶解多种色素，如叶绿素等以及树脂、淀粉粒、蛋白质、菊糖、挥发油，而各种晶体不溶解。有清洁、透明作用，使细胞、组织透明、清晰，便于观察细胞形状和组织构造及细胞内含的各种结晶体。

5．扫描电子显微镜和偏光显微镜的应用

（1）扫描电子显微镜：分辨率高，可达3nm，放大倍数从十几倍到几十万倍，图像富有立体感。

（2）偏光显微镜：主要用于观察和分析矿物类中药的光学性质，也可用于研究动物、植物类中药的组织及细胞后含物，如淀粉粒、草酸钙簇晶等。对于透明矿物，一般使用透射光源的偏光显微镜，对于不透明矿物则使用放射光源的偏光显微镜。

（四）理化鉴定法

1．物理常数的测定 包括相对密度、旋光度、折光率、硬度、黏稠度、沸点、凝固点、熔点等的测定。这对挥发油类、油脂类、树脂类、液体类药（如蜂蜜等）和加工品类（如阿胶等）药材的真实性和纯度的鉴定，具有特别重要的意义。药材中如掺有其他物质时，物理常数会随之改变。如蜂蜜的相对密度在1.349以上，掺水会影响黏稠度，使相对密度降低；薄荷油相对密度为0.888～0.908；肉桂油的折光率为1.602～1.614；冰片（合成龙脑）的熔点为205～210℃。

2．一般理化鉴别

（1）化学定性分析：利用中药中的化学成分能与某些试剂产生特殊的气、味、颜色、沉淀或结晶等反应来鉴别中药的真伪。

（2）中药的膨胀度：膨胀度是药品膨胀性质的指标，系指按干燥品计算，每克药品在水或其他规定的溶剂中，在一定的时间与温度条件下膨胀所占有的体积（ml）。主要用于含黏液质、胶质和半纤维素类中药的真伪和质量控制。药材中含有的黏液质、果胶、树胶等成分有吸水膨胀的性质，其吸水膨胀的程度和其所含的黏液等成正相关，可通过测定膨胀度进行鉴别。如南葶苈子和北葶苈子的外形不易区分，北葶苈子膨胀度不低于12，南葶苈子膨胀度不低于3，两者的膨胀度差别较大，通过测定比较可以区别二者。（2011，2012年）哈蟆油膨胀度不得低于55，伪品膨胀度远低于此，可资区别。膨胀度同时也是对中药质量优良度的一种评判方法，如哈蟆油和车前子正品一般膨胀度越大，其质量越好。

（3）微量升华：利用中药中所含的某些成分，在一定温度下能升华的性质获得升华物，在显微镜下观察其结晶形状、色泽，或取升华物加某种试液观察其反应来进行鉴别。如大黄粉末升华物为黄色针状、片状或羽毛状结晶，在结晶上加碱试液显红色，确证其为蒽醌类化合物；斑蝥升华物为白色柱状或小片状结晶（斑蝥素），加碱液溶解，再加酸液又析出结晶。

（4）荧光分析：利用中药中所含的某些化学成分在紫外光或常光下能产生一定颜色的荧光的性质进行鉴别。紫外光灯的波长为365nm，如用短波（254～265nm）时应加以说明。可将中药断面、饮片、粉末或浸出物放在紫外光灯下观察。如黄连折断面在紫外光灯下显金黄色荧光（2010年），木质部尤为明显；秦皮的水浸液在自然光下显碧蓝色荧光（2009，2010，2011年）；芦荟水溶液与硼砂共热，即起反应显黄绿色荧光。

（5）显微化学分析：将药材的切片、粉末或浸出物等置于载玻片上，加某些化学试剂后产生沉淀或结晶，在显微镜下观察其形状和颜色进行鉴别。如丁香切片滴加3%氢氧化钠的氯化钠饱和溶液，油室内有针状丁香酚钠结晶析出。利用显微和化学方法确定中药有效成分在中药组织构造中的部位，称为显微化学定位试验。如北柴胡横切片加1滴无水乙醇－浓硫酸（1∶1）试液，在显微镜下观察可见木栓层、栓内层和皮层显黄绿色至蓝绿色，示其有效成分柴胡皂苷存在以上部位。

（6）泡沫指数和溶血指数：利用皂苷的水溶液振摇后能产生持久性的泡沫和溶解红细胞的性质，可测定含皂苷类成分药材的泡沫指数或溶血指数作为质量指标。如用泡沫反应鉴别猪牙皂。

3．色谱法

（1）薄层色谱法：是目前中药鉴定中用于定性鉴别使用最多的色谱法之一（2011年）。

（2）高效液相色谱法：为中药含量测定方法的首选和主流（2008，2012年）。

（3）气相色谱法：适用于含挥发油及其他挥发性成分的药材及中成药的分析。

（4）电泳色谱法：用于动物药、果实种子类及根茎类等含蛋白质及氨基酸类成分的药材的真伪鉴别。

4．分光光度法

（1）紫外-可见分光光度法：适用于主成分或有效成分在200～760nm处有最大吸收波长的中药，既可作定性分析又可作含量测定，适用于大类成分的含量测定，如总黄酮、总生物碱、总蒽醌等。

（2）红外分光光度法：是鉴别化合物和确定物质结构的常用手段之一，可以用来鉴别中药的真伪优劣。

（3）原子吸收分光光度法：是目前用于测定中药中重金属及有害元素、微量元素最常用的方法，2010年版一部采用本法进行重金属及有害元素限量检查（2011年）。

5．色谱、光谱和质谱联仪分析法 《中国药典》2010年版一部用液相色谱-质谱联仪分析技术对国产千里光（2011年）、川楝子、苦楝皮中的毒性成分进行了限量检查。

（五）其他鉴定方法和技术简介

1．DNA分子遗传标记技术 比较物种间DNA分子的遗传多样性的差异来鉴别中药的基原，通过选择适当的DNA分子遗传标记方法，能在属、种、亚种、居群或个体水平上对研究对象进行准确的鉴别。可用于近缘中药品种的鉴定和整理研究、动物类中药的鉴定、名贵药材与混伪品的鉴定、药材道地性的鉴定、中药野生品与栽培（养殖）品的鉴定、特殊药材的鉴定。

2．中药指纹图谱 可分为中药化学（成分）指纹图谱和中药生物指纹图谱。目前在中药质量控制方面以中药化学（成分）指纹图谱中的色谱指纹图谱为首选方法，如高效液相色谱指纹图谱、气相色谱指纹图谱、薄层扫描指纹图谱和高效毛细管电泳指纹图谱等。

3．中药生物活性测定法 包括生物效价测定法和生物活性限制测定法。《中国药典》2005年版和2010年版一部中，水蛭采用了生物效价检测方法控制其质量。