生物技术药物体内分析的发展趋势

自1982年第一种生物技术药物——重组人胰岛素上市之后，生物技术药物开始蓬勃发展起来，每年批准上市的生物技术药物的数量都在增加，种类在不断完善，临床应用更加广泛，这使得药物分析的研究对象趋于多样化。生物技术药物多为大分子且结构较为复杂的化合物，同时具有多方面的生物活性，在分析方法的选择上需要考虑更多的因素。体内药物分析是测定来源于生物体的生物基质中药物及其代谢产物的方法，生物样品中药物的含量通常很低，对其分析方法也提出了更高的要求。

目前在对生物技术药物的分析方法中，主要有酶分析法、免疫分析法和电泳分析法等近20种。在体内药物分析的方法中，各种分析技术的联合使用是主要的发展方向，如在线微透析－毛细管电泳(on－line MD/CE)、液相色谱－质谱(LC/MS)、琼脂糖凝胶电泳－酶联免疫分析(SDS－PAGE/ELISA)、高效液相色谱－核磁共振(HPLC/NMR)等，广泛应用于各种生物技术药物的体内分析，在分析方法中所占的比重越来越大。联用技术的应用使常规生物技术药物分析方法更加准确、简便和自动化，使生物技术药物的体内分析方法趋于更加灵敏、专属和快速。

除了常规方法的使用或联合使用之外，随着生物医药领域及生物药物药代动力学研究领域发展的巨大要求，新的分析技术和方法也在快速的发展之中。表面加强激光解析电离化飞行时间质谱(surface enhanced laser desorption ionization time of flightmass spectrometry，SELDITOF－MS)是一种全新的蛋白质组学研究技术，利用不同类型芯片捕获样本中的相关蛋白质，蛋白质吸附于特定的芯片表面后，洗去弱结合蛋白质，再加上特殊的能量吸收分子，利用激光脉冲辐射使吸附的蛋白质解析形成电荷离子。利用TOF－MS的分析特点，不同质荷比的离子在真空电场中，根据飞行时间的差异，导致检测器接收到先后及强弱均不同的电信号，从而得到质谱图。这样，便可以在少量的生物样本中同时发现多个低丰度的生物标记物，通过寻找和筛选不同样本之间蛋白质谱存的差异，从而获得对某些关键蛋白的定性和功能分析。SELDI－TOF－MS技术可以分析血清中蛋白质的完整信息，发现未知生物标记物，在临床上对肿瘤的早期诊断、发病机制和新药研发都有着重要的意义。基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDL－TOF－MS)，MALDL是一种质谱软电离技术，解决了非挥发性热不稳定的生物大分子的质谱离子化问题，结合TOF－MS的特点，不仅能在低于10～12 mol的样品条件下和复杂混合物中准确测定生物大分子化合物，而且与生化方法结合，通过对酶解产物的质谱分析，得到大分子化合物的结构信息和特征，对多肽和蛋白质类进行一级结构的确证，方法的灵敏度与准确度远高于常规的分析方法，在测定生物大分子方面发挥着重要的作用。各类传感器技术也在不断发展并广泛应用于生物技术药物的体内分析，如电化学传感器、光学传感器、温度传感器以及力学传感器等。生物传感器(biosensors)又称为生物电极，目前已开发出酶传感器、免疫传感器等多种，利用发光反应的发光免疫传感器等。生物传感器技术利用对特异性反应的测定、生物催化反应的测定以便对生物样品中的生物大分子物质进行分析。

生物技术药物的快速发展以及其在临床上针对困扰人类健康的较难治愈的疾病方面所发挥的不可替代的作用，使得生物技术药物的体内分析方法不断地向更高的专属性、灵敏度、稳定性和分析效率的方向发展，每种分析方法都有各自的优势和特点，多种分析技术的联用可以更加全面和完善地完成分析工作，这依然是未来生物技术药物体内分析的主要方法。

【思考题】

1.列举常用的生物技术体内分析方法。

2.与化学药物相比，生物技术药物体内药物分析方法的特点。

3.简述免疫分析法的原理，列举主要的免疫分析方法及各自的特点。