【摘要】：激光扫描共聚焦显微技术的出现使人们动态同时观察细胞超微立体构造及功能状态的梦想成为现实。该技术在生物医学研究中主要有下述作用。这使神经细胞及细胞器的形态学结构生动逼真。然而,激光扫描共聚焦显微技术也有局限性,如用于该技术的样本最好是分散细胞,而石蜡包埋组织切片样本则不适用。另外,该技术主要的基础是免疫荧光染色和荧光原位杂交技术,探针或抗体荧光标记质量直接影响检测结果。
激光扫描共聚焦显微技术的出现使人们动态同时观察细胞超微立体构造及功能状态的梦想成为现实。该技术在生物医学研究中主要有下述作用。重建组织、细胞的三维立体空间结构;进行组织、细胞的光学断层切片,即利用计算机和图像处理系统对组织、细胞及细胞器断层扫描,也就是通常说的“细胞CT”或“组织CT”功能;观察多种非染色、染色及荧光标记的组织和细胞;长时间动态观察、监测活细胞生理信号变化;测定细胞内酸碱度、离子及神经递质浓度;分选黏附细胞;完成荧光漂白恢复技术,即利用高强度脉冲式激光照射细胞的某一区域,造成该区域荧光分子的漂白,而该区域周围的非漂白荧光分子将以一定速率向受照射区扩散,其扩散速率可被该技术直接监测。该技术可用于研究细胞间通讯、细胞骨架构成、生物膜结构和大分子组装,测定膜电位及膜流动性和实施光活化等。如观察神经细胞形态时,用模拟荧光处理能将系列光学切片的数据合成三维图像,并能从多个角度观察。这使神经细胞及细胞器的形态学结构生动逼真。借助特定的与抗体结合的荧光探针能同时对细胞内几种成分(抗原)进行免疫荧光定位、定量分析。然而,激光扫描共聚焦显微技术也有局限性,如用于该技术的样本最好是分散细胞(培养细胞、爬片细胞等),而石蜡包埋组织切片样本则不适用。另外,该技术主要的基础是免疫荧光染色和荧光原位杂交技术,探针或抗体荧光标记质量直接影响检测结果。
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