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细胞培养室条件有哪些

时间:2022-04-21 理论教育 版权反馈
【摘要】:无菌室是进行细胞培养必不可少的无菌操作空间,其面积和结构可依据条件和要求而定,但必须满足下列条件。能按要求恒定地向CO2培养箱内提供一定浓度的CO 2,同时保持箱内温度和湿度稳定。常用的使用条件为37℃、CO 2浓度为5%。为保持要求的箱内湿度,培养箱内应放置装有无菌蒸馏水的水槽。使用过程中不要将液氮罐口密封。天平、离心机、水纯化装置、电热鼓风干燥箱、恒温水浴锅等也是细胞培养实验室的常用设备。


(一)无菌室

无菌室是进行细胞培养必不可少的无菌操作空间,其面积和结构可依据条件和要求而定,但必须满足下列条件。①可密闭空间,空间洁净度应达到10 000级;②通风、透气良好;③内部应平整光滑,适于擦洗和消毒;④配有杀菌装置,如:紫外线灯。

(二)超净工作台

超净工作台能利用高效过滤器过滤掉空气中的微生物,并使无菌空气以微流方式从工作台的工作空间流到工作空间外,以保证工作空间的无菌状态。工作台上方通常配有紫外线杀菌灯,用以杀死操作台面的微生物。使用超净工作台前,应先用紫外线灭菌灯照射30min,再用75%乙醇擦洗台面,待关闭灭菌灯、启动鼓风机运转5min后,方可进行培养操作。

(三)CO2培养箱

能按要求恒定地向CO2培养箱内提供一定浓度的CO 2,同时保持箱内温度和湿度稳定。常用的使用条件为37℃、CO 2浓度为5%。为保持要求的箱内湿度,培养箱内应放置装有无菌蒸馏水的水槽。箱内空气必须保持清洁,应定期紫外线照射或乙醇消毒。

(四)倒置显微镜

倒置显微镜的一般构造与普通显微镜相似,有目镜、物镜、光源、光路系统等,但倒置显微镜光源位于载物台上方,光线由上至下照射观察物,物镜位于载物台下方。观察培养细胞的常用放大倍数为:物镜10×或20×,目镜10×。

(五)高压蒸汽灭菌器

用于实验用品的消毒灭菌处理。

(六)冰箱

用于培养液、缓冲液、消化液等实验用液体的存放及组织标本的短期存放。

(七)细胞冷冻保存器

冷冻保存器常用的是液氮容器,即液氮罐。主要用于细胞、组织块等活性材料的长期保存。使用过程中不要将液氮罐口密封。液氮应定期加注,加注液氮和取、放标本时应注意个人防护,以免飞溅液氮伤人。

(八)其他

天平、离心机、水纯化装置、电热鼓风干燥箱、恒温水浴锅等也是细胞培养实验室的常用设备。除常用设备外,细胞培养实验室最好还有一些用于特殊检测的专用设备如:用于精准检测、分选细胞的流式细胞仪,用于荧光染色样本观察的倒置荧光显微镜及用于免疫测定及细胞毒性和药物敏感性检测的酶联免疫检测(酶标)仪等。

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