【摘要】：配制方法:先将重铬酸钾溶于少量蒸馏水,再加硫酸,最后加蒸馏水至100ml。用前将原液配成工作液,即刻使用。试剂:包括5%硝酸银水溶液2.5ml、5%四硼酸钠水溶液2.5ml、3%乌铬托品水溶液12.5ml与蒸馏水12.5ml。
(一)试剂配制
1.氧化剂原液
(1)试剂:重铬酸钾10g,硫酸10ml与蒸馏水100ml。
(2)配制方法:先将重铬酸钾溶于少量蒸馏水,再加硫酸,最后加蒸馏水至100ml。用前将原液配成工作液,即刻使用。
2.六胺银工作液
(1)试剂:包括5%硝酸银水溶液2.5ml、5%四硼酸钠水溶液2.5ml、3%乌铬托品水溶液12.5ml与蒸馏水12.5ml。
(2)配制方法:先将蒸馏水与乌铬托品水溶液混合,加入硝酸银水溶液,此时溶液变为乳白色,搅拌后色消失,再加入四硼酸钠水溶液,即可使用。
(二)操作方法
1.切片脱蜡至水。
2.入5%铬酸氧化剂,60℃温箱中作用60min。
3.自来水洗,蒸馏水洗。
4.六胺银工作液浸染60~90min。
5.自来水洗,蒸馏水洗。
6.用0.1%氯化金处理5min。
7.自来水洗,蒸馏水洗。
8.用5%硫代硫酸钠处理5min。
9.自来水洗,蒸馏水洗。
10.用0.5%淡绿或中性红对比染色。
11.常规脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
(三)结果
星形隐球菌:深黑色,菌壁周边深黑,中间为空白区;背景:红色;曲菌的孢子和菌丝:深黑色,孢子周边黑色,中间为空白区,菌丝呈多结节分布,有45°分支,有的散花状分布;其他菌丝:黑色。
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