【摘要】：试剂:胭脂红2g,碳酸钾1g,氯化钾5g,蒸馏水60ml与氢氧化铵20ml。储存液配制方法:除氢氧化铵外其余试剂一起加入烧瓶,于水浴锅中加热至沸腾,冷却、过滤后加入氢氧化铵,放入磨口瓶,置于4℃冰箱储存,备用。
(一)试剂配制
1.Best胭脂红储存液
(1)试剂:胭脂红(carmine)2g,碳酸钾(potassium carbonate)1g,氯化钾(potassium chloride)5g,蒸馏水60ml与氢氧化铵(ammonium chloride)20ml。
(2)储存液配制方法:除氢氧化铵外其余试剂一起加入烧瓶,于水浴锅中加热至沸腾,冷却、过滤后加入氢氧化铵,放入磨口瓶,置于4℃冰箱储存,备用。
(3)工作液配制:取储存液10ml,氢氧化铵15ml,甲醇15ml,加热混匀后即可使用。
(4)分化液:取无水乙醇20ml,甲醇10ml,蒸馏水25ml,加热混匀后即可使用。
2.Carnoy液 无水乙醇60ml,三氯甲烷30ml,冰醋酸10ml。
(二)操作方法
1.组织用Carnoy液、无水乙醇或丙酮固定。
2.切片脱蜡至水。
3.苏木素细胞核染色10min。
4.自来水冲洗,蒸馏水洗,盐酸乙醇分化。
5.流水冲洗10min,蒸馏水洗。
6.工作液浸染30min。
7.分化液快速分化2次,每次1s。
8.无水乙醇脱水。
9.二甲苯透明,中性树胶封固。
(三)结果
细胞核:蓝色;基质:鲜红色或玫瑰红色。
(四)注意事项
1.必须有消化的切片作对照。
2.应用PAS反应时,所用器皿一定要干净,否则会产生污染或沉淀。
3.PAS反应时,切片不要用手触摸,手中的汗液会与试剂发生阳性反应。
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