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二剂量法(四点法)

时间:2023-04-16 理论教育 版权反馈
【摘要】:1.原理 抗生素微生物效价测定法,按照观察的方法及其生物反应的类型是属于量的反应,即抗生素对微生物作用所产生的抑菌圈的大小,是随抗生素剂量的变化而变化的,是可以测量的,故可采用标准品与供试品对比试验的平行线原理,实验设计求其浓度和反应的直线关系。在规定条件下培养后,测量各个抑菌圈直径。

(一)设计原理与计算公式

1.原理 抗生素微生物效价测定法,按照观察的方法及其生物反应的类型是属于量的反应,即抗生素对微生物作用所产生的抑菌圈的大小,是随抗生素剂量的变化而变化的,是可以测量的,故可采用标准品与供试品对比试验的平行线原理,实验设计求其浓度和反应的直线关系。即在一定的抗生素浓度范围内,其对数剂量和抑菌圈直径(或面积)呈直线关系:标准品(S)和供试品(T)属同质的抗生素时,S和T对一定试验菌所得的剂量反应的两条直线应相互平行,用统计分析方法算出S和T等反应剂量,对比出供试品效价的检测方法。

2.计算公式

设:S2=高剂量标准品所致的抑菌圈直径

S1=低剂量标准品所致的抑菌圈直径T2=高剂量供试品所致的抑菌圈直径T1=低剂量供试品所致的抑菌圈直径θ=供试品与θ标准品的效价比率I=高剂量与低剂量比

当效价测定,用几个双碟为一组用抑菌圈直径的总和计算,二剂量法计算公式为:(7)当高剂量与低剂量比I为:(8)1(9)

(二)效价测定方法

1.材料准备 培养液、菌种、标准品、供试品及双碟的制备等,均见中国药典附录XIA抗生素微生物检测法。

2.标准品溶液 高剂量点的抑菌圈直径应在18~22mm,高剂量与低剂量的抑菌圈直径之差最好不<2mm,但有些抗生素的差数较小。

3.测定方法 取备妥的双碟(不少于4个),在每一双碟中对角的2枚小钢管之中,分别滴满高浓度及低浓度的标准溶液,另2个小钢管中分别滴满高低两种浓度的供试品溶液。高低浓度的剂距为2∶1或4∶1。在规定条件下培养后,测量各个抑菌圈直径。

4.供试品效价的计算 可应用前述的公式求得lgθ,从而求得供试品效价。

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