睫状后短动脉（SPCA）是脉络膜和前部视神经血供的主要来源，本实验采用切断兔眼部分SPCA造成脉络膜和前部视神经缺血的动物模型，研究脉络膜和前部视神经缺血的形态学和病理生理等，并对比观察妥拉唑啉（tolazoline，TZL）扩血管药和复方樟柳碱（compound anisodine，CA）对眼缺血的疗效。通过其对TXB2、6-Keto-PGF1α及VIP的影响，探讨CA改善缺血的机制。
（一）切断兔眼部分SPCA制成眼缺血模型
全麻下（15%噻胺酮10 mg/kg），术者戴放大镜，于下方角膜缘剪开球结膜暴露下直肌，避开涡静脉和睫状后长动脉小心分离，在距视神经8～10 mm处，紧贴巩膜剪断4支SPCA，缝合肌肉、球结膜。
（二）动物分组
灰色兔48只，随机分4组：单纯缺血组；生理盐水治疗对照组；妥拉唑啉（TZL）12.5 mg（2 m1）治疗组；复方樟柳碱（CA）2 ml治疗组。
颞浅动脉旁即颞部皮下注射（耳根后凹陷处）1/d，持续2周。另20只兔40只眼：随机分正常组、缺血1 h、3 h、3 d各6只眼；1 d、1周、2周各5只眼。
（三）观察指标
1．缺血形态、FFA观察。
2．视网膜电生理（ERG）。
3．血管活性物质测定（TXB2 6-Keto-PGF1x VIP）。
4．病理观察：光镜、电镜。
（四）结果
1．眼底镜、眼底照相和荧光血管造影 切断兔眼SPCA 2 h之内，未见眼底有异常表现。切断后3～5 h内即可见缺血灶。表现为视盘下方视网膜呈灰白色水肿、渗出，病灶边缘模糊，形态多为三角形、扇形，其尖端指向视盘，底部向赤道部扩展。视盘水肿边缘模糊，两侧有髓纤维水肿，严重者视盘表面血管在水肿区内时隐时现（图11-1）。
FFA：视网膜水肿病灶相对应部位的视盘和脉络膜荧光缺损，边界清晰，呈三角形。缺血早期24 h以内，缺血区边缘的脉络膜血管扩张，有强荧光渗漏（图11-2）。
缺血范围随时间有所扩大，24～48 h达高峰。3 d后缺血区局限，1周后缺血灶边缘色素增生，2周后水肿基本消退，遗留大片萎缩灶。晚期视神经萎缩。
CA治疗组：减轻缺血区视网膜水肿渗出，使缺血区局限化，缩小病灶范围。
TZL治疗组：缺血区改善不明显，甚至加重缺血，有时在陈旧病灶周围有较新鲜水肿灶（图11-3）。
2．视网膜电流图（ERG）的变化 缺血1 h，视网膜无水肿；ERGa、b波和Ops振幅值不仅不降反而比正常增高，P＜0.01（表11-1）。缺血3 h，a、b波幅值比正常组降低（P分别<0.05和0.01），Ops的变化无显著性。缺血24 h，各波幅值明显低于正常（P<0.01），且处于缺血后各时程的最低值。以后各波幅的振幅虽比24 h略有恢复，但均明显低于正常组（P<0.01）。
图11-1 切断SPCA眼底缺血形态缺血2 h眼底正常；右缺血3～5 h的视神经、视网膜水肿的缺血灶
图11-2 切断SPCA的FFA
左为正常：右为缺血3 h脉络膜和视盘荧光缺损
图11-3 CA与TZL治疗的眼底像
治疗1周：左为CA组病灶局限；右为TZL治疗组病灶广泛
CA治疗对视网膜a、b波有较好的保护作用（表11-2，表11-3），明显优于TZL治疗（P<0.01）；虽然CA治疗1周、2周时Ops幅值低于正常组，但和TZL治疗组比较，差异显著（P<0.05）。
表11-1 部分SPCA切断后ERG的变化（μV）
*P<0.05，**P<0.01，和缺血前比较
表11-2 CA及TZL治疗1周的ERG变化（μV）
*P<0.05，**P<0.01，和缺血前比较：△△P<0.01，和NS比较；++P<0.01，和TZL比较
表11-3 CA及TZL治疗2周的ERG变化（μV）
*P<0.05，和正常组比较；△P<0.05，△△P<0.01和NS比较；+P<0.05，++P<0.01，和TZL比较
3．脉络膜TXB2、6-Keto-PGFlα及VIP变化 见表11-4，表11-5。
表11-4 部分SPCA切断后脉络膜TXB2、6-Keto-PGFlα及VlP变化（pg/mg）
*P<0.05，**P<0.01，与正常组比较
表11-5 CA及TZL治疗2周脉络膜TXB2、6-Keto-PG Flα及VlP变化（pg／mg）
##P<0.01，和正常组比较；△P<0.05，△△P<0.01和NS治疗组比较；+P<0.05，++P<0.01，和TZL治疗组比较
从表11-4可见：正常组TXB2、低于6-Keto-PGFlα，缺血1 h，脉络膜组织TXB2、6-Keto-PGFlα及VIP均升高，缺血3 h，24 h，TXB2均高于6-Keto-PGFlα；TXB2/6-Keto-PGFlα分别为1.01、1.12（正常为0.83），缺血3 d，三种血管活性物质均低于正常水平P<0.01。
表11-5 显示：CA治疗2周，其TXB2/6-Keto-PGFlα比值及VIP均与正常值无差异，TZL治疗组则缩血管TXB2高于扩血管6-keto-PGFlα，两者比值及VIP均与正常值及CA治疗组有显著差异。△P<0.01。说明CA治疗2周，使血管活性物质趋向正常，而TZL治疗2周则扩血管活性物质降低，所以加重血管痉挛、加重缺血（图11-4）。
图11-4 不同治疗血管活性物质的变化
CA治疗其缩血管和扩血管物质的比值与正常眼比较无统计学意义，TZL治疗其缩血管物质相对升高，扩血管物质降低，两者的比值与正常眼比较P<0.01差异极显著
（五）病理观察
1．光镜观察
（1）视网膜组织：光镜下，缺血1 h视网膜改变不明显。缺血3 h视网膜感光细胞层、外核状层结构松散，排列紊乱。外丛状层和内丛状层疏松水肿，呈网格样改变。神经节细胞极度水肿，胞质呈空泡样（图11-5）。
（2）视神经组织：光镜下，缺血1～3 h，视神经结构改变不明显。缺血24 h，神经轴索水肿，膨胀，结构疏松；缺血1周，可见局部梗死灶（图11-6）。
2．透射电镜观察 缺血1 h，视网膜色素上皮细胞质内线粒体嵴模糊或消失，线粒体肿胀空泡化；视细胞外节盘膜紊乱；外核层细胞核固缩、崩解，Bruch膜完整。缺血3 d后色素上皮及视细胞外界节紊乱更明显。缺血1 h，视盘有髓神经纤维鞘疏松扭曲，轴索空泡变性，间质内小血管内皮细胞肿胀，线粒体水肿空泡化。
TZL治疗后，神经纤维鞘疏松扭曲，轴索肿胀，线粒体水肿空泡化（图11-7）。
CA治疗后，髓鞘和轴索的改变均有不同程度减轻，虽然髓鞘板层结构也有疏松扭曲，部分轴索线粒体水肿，但总体上髓鞘板层结构排列紧密，极少有囊样改变的轴索，见图11-7。
图11-5 切断SPCA光镜下视网膜病理变化
视网膜各层水肿，神经节细胞空泡化
图11-6 切断SPCA光镜下视神经变化
a．正常；b．缺血24 h：髓鞘疏松；c．缺血7 d：神经梗死
图11-7 CA与TZL治疗透射电镜视神经变化对比
TZL治疗1周、2周：髓鞘疏松，轴索肿胀，线粒体空泡化；CA治疗1周、2周：髓鞘、轴索、线粒体改变均较轻
本实验提示：CA治疗，使缺血区脉络膜血管活性物质始终保持正常水平，有利于解除脉络膜血管痉挛，恢复脉络膜血管正常舒缩功能，促进侧支循环的建立。减轻脉络膜缺血所致的视神经、视网膜缺血的病理改变。此外，脉络膜血管上的VIP能神经起自面神经发出的副交感神经，CA通过注射部位的面神经末梢调节脉络膜血管的自主神经活动，调整脉络膜缺血区血管的舒缩功能，从而起到改善脉络膜血管缺血的作用。
TZL治疗：对正常血管有扩张作用。但缺血时胶原纤维暴露，使血小板激活，聚集性增强并释放TXA2，致血管痉挛收缩；同时，缺血损伤血管内皮细胞，血管张力减弱甚至消失，而缩血管反应依然存在，许多递质的舒血管效应转变为缩血管效应。因此，缺血早期用TZL治疗使脉络膜血管活性物质异常变化，造成缺血区广泛，视神经、脉络膜、视网膜病变改变严重。
[本实验发表于中国实用眼科杂志，1996,14(3):175．申维勇，宋琛]
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