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尿液β-微球蛋白测定

时间:2022-04-10 理论教育 版权反馈
【摘要】:样品中的β2-微球蛋白和125I标记物共同竞争性的与抗β2-微球蛋白单克隆抗体结合。从标准曲线上求出β2-微球蛋白的浓度。肾移植术后若持续出现尿液β2-微球蛋白增高,说明排斥反应未得到有效控制。因此要同时检查血β2-微球蛋白,只有血β2-微球蛋白<5mg/L时,尿β2-微球蛋白增高才能反映肾小管损伤。

尿液β2-微球蛋白是一种相对分子量仅11 800的蛋白质,是体内除成熟红细胞和胎盘滋养层外,所有细胞特别是淋巴细胞和肿瘤细胞膜上人类白细胞抗原的轻链蛋白组分,因电泳出现于β2区带而得名。正常人尿液β2-微球蛋白生成量相对恒定,150~200mg/d,因其相对分子量小且不和血浆蛋白结合,可自由经肾小球滤入原尿,其中99.9%由近端肾小管以胞饮形式重吸收,并在肾小管上皮细胞中分解破坏,故仅有微量β2-微球蛋白随尿液排出。

【测定原理】

β2-微球蛋白为肾小管性蛋白尿,用干化学法检测为阴性,用加热乙酸法可为阳性。定量方法有3种。

1.特定蛋白检测仪法 采用速率散射比浊法的原理。光沿水平轴照射时,碰到小颗粒的免疫复合物可导致光散射,散射光的强度与复合物的含量呈正比。待测抗原越多,形成的复合物也越多,散射光就越强。此种方法是一种抗原抗体结合的动态测定法,在抗原与抗体反应的最高峰测定其复合物形成的量。此法检测速度快,灵敏度和精密度高,稳定性好。

2.酶联免疫吸附法 首先使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性,然后使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体。加入酶反应底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。该种方法具有高度的灵敏度和特异性,几乎所有的可溶性抗原系统均可用其检测。操作简便,但受酶活性、温度、测定系统pH、离子强度等影响。

3.放射免疫法 用β2-微球蛋白直接免疫动物可以制备单克隆或多克隆抗体。样品中的β2-微球蛋白和125I标记物共同竞争性的与抗β2-微球蛋白单克隆抗体结合。以羊抗鼠IgG抗血清作为特异性免疫分离剂。从标准曲线上求出β2-微球蛋白的浓度。此种方法灵敏度、精密度和准确度高,特异性强。但核素放射性对人体有一定的危害,要加以防护。

【参考范围】

定量试验:<0.2mg/L或370μg/24h

【临床应用价值】

尿液β2-微球蛋白主要用于评估肾脏早期损伤时肾小球和近端肾小管功能。

1.增高见于肾小管-间质性疾病、药物或毒物所致的早期肾小管损伤。肾移植术后若持续出现尿液β2-微球蛋白增高,说明排斥反应未得到有效控制。

2.由于肾小管重吸收β2-微球蛋白的阈值为5mg/L,超过阈值时,大量β2-微球蛋白从尿中排出。因此要同时检查血β2-微球蛋白,只有血β2-微球蛋白<5mg/L时,尿β2-微球蛋白增高才能反映肾小管损伤。

【影响因素】

β2-微球蛋白在pH 5.0以下的酸性尿中极易分解破坏,所以尿液收集后应及时检测,若不能立即测定,应将尿液调节至pH 6.5~7.0,冷冻保存。

(李 薇)

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