靶向凋亡调节因子

凋亡为生理性细胞死亡。凋亡的存在，对细胞数目的平衡起着非常重要的作用。如果细胞凋亡调控失常，可致使细胞生存而积聚，对人类肿瘤发生至关重要。凋亡调节机制极为复杂，研究较多的凋亡调节家族为bcl－2家族，此家族成员有抗凋亡如bcl－2、bcl－XL、Mcl－1等，也有促凋亡的如bax、bad、box、bid、bod、bik、bim等。抗凋亡／促凋亡成员比值，决定细胞的命运。

细胞凋亡通过半胱氨酸、天冬氨酸特异性蛋白酶家族中caspase来实现。Caspase以无活性的酶原存在，其激活有两条途径：①内源（线粒体）途径，发生于细胞本身内，线粒体受刺激后释放细胞色素C与Apaf－1连接激活caspase－9，转又激活下游caspase－3，引起凋亡；②外源（死亡受体）途径，TNF受体家族中Fas与配体FasL结合形成FADD连接蛋白TRADD激活caspase－8，再激活caspase－3引发凋亡。上游的caspase－8和－9为凋亡启动因子，下游的caspase－3，－7为效应因子执行凋亡。抗凋亡的bcl－2和bcl－XL抑制线粒体释放细胞色素C，而促凋亡的bax则使线粒体释放细胞色素C，为此，如降低bcl－2或提高bax可增加凋亡。

近年来，又发现新抗凋亡蛋白家族（IAP），在调控凋亡和bcl－2家族同样重要。迄今IAP家族至少有7个成员：神经元凋亡抑制蛋白（neuronal apoptosis inhibiting protein，NAIP）、性联性IAP（x－chromosome linked IAP，XIAP）、人或细胞IAP－1（human或cellular IAP，HIAP－1或cIAP－1）、cIAP－2（HIAP－2）、apollon、livin和生存素（survivin），以生存素研究较多。生存素抑制活化的caspase－3，－7，为此caspase激活的上述两条途径都能抑制而抗凋亡。XIAP的活性要强于生存素。下调IAP家族的表达可增强凋亡。

1．降低bcl－2　bcl－2反义寡核苷酸G3139可特异性抗bcl－2。细胞渗透性bcl－2结合肽可选择性杀伤高表达bcl－2的恶性细胞。AntimycinA可结合bcl－2相关蛋白促进凋亡。

治疗APL的ATRA可降低bcl－2，靶向细胞微管系统的药物长春新碱，使bcl－2磷酸化而灭活。另一种反义寡核苷酸4625可同时靶向bcl－2和bcl－XL。ATO可降低bcl－XL增强凋亡。

2．激活线粒体——caspase活化途径　Schimmer等发现AML患者有caspase活化途径功能缺陷。24例AML中15例两条激活途径均有缺陷，1年存活率35%，10例于16个月内死亡；而9例仅有一条途径缺陷者，1年存活率89%，2例死亡，还发现两条途径均阻滞者92%耐药。为此，激活caspase可作为治疗靶的向。ATO可直接作用于线粒体释放细胞色素C，激活caspase－9转而激活caspase－3引起凋亡。此外，还可阻滞过氧化物的降解，通过游离基形成氧化应激，激活Jun　N端激酶（JNK）和活化蛋白1（AP－1）加强细胞凋亡，维生素C与ATO有协同作用。ATO还能使细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子P15、P16和P21重新表达或表达增强使细胞主要阻滞在Go／G1阶段，少数阻滞于G2／M期，诱导S期细胞凋亡。

核因子（NF）κB有阻滞凋亡作用，其抑制药SN50可降低抗凋亡bcl－2、A1、XIAP、cIAP－1、cIAP－2、生存素，提高促凋亡bax，增强线粒体释放细胞色素C，激活caspase－9和3，增强化疗药的敏感，促进凋亡。

3．靶向IAP家族　ATRA能减低白血病细胞系HL－60、NB－4、OCI－AML3表达生存素。血管内皮细胞因子（VEGF）可上升调内皮细胞表达生存素和XIAP的表达，ATRA可抑制VEGF和血管生成，从而间接降低生成素和XIAP表达，ATO可降低XIAP。寡核苷酸4003可抑制70%生成素mRNA的表达。NFκβ抑制药SN50可抑制多种IAP，已如前述。