心血管活动的神经体液调节

【实验目的】

1．学习哺乳类动物动脉血压的直接测量方法。

2．通过观察动脉血压的变化，掌握心血管活动的神经和体液调节。

【实验原理】

心脏和血管的活动受神经、体液和自身机制的调节。支配心脏的传出神经主要为心交感神经和心迷走神经，心交感神经兴奋可致心率加快，房室交界的传导加快，心房肌和心室肌的收缩能力加强，而心迷走神经兴奋可致心率减慢，心肌收缩能力减弱，房室传导速度减慢。绝大多数血管平滑肌受自主神经支配，主要是交感缩血管神经纤维，兴奋时使血管收缩，外周阻力增加，同时由于容量血管收缩，静脉回流增加，心输血量亦增加。神经系统通过心血管反射（如压力感受性反射等）调节心血管的活动，改变心输出量和外周阻力，从而调节动脉血压。

心血管活动除受神经调节外，还受体液因素的调节，其中最主要的为肾上腺素和去甲肾上腺素。肾上腺素可与α和β两类肾上腺素能受体结合，使心率加快，收缩力加强，传导加快，心输出量增加。其对血管的作用取决于血管平滑肌上两类受体分布的情况。一般来说，在整体情况下，小剂量肾上腺素主要引起体内血液重新分配，对总外周阻力影响不大，但大剂量的肾上腺素亦可使外周阻力明显升高。去甲肾上腺素主要激活α受体，所以其作用主要是引起外周血管广泛收缩，通过增加外周阻力而使动脉血压升高，对心脏的直接作用远较肾上腺素为弱，而且在外源性给予时，常因明显的升压作用而通过窦弓反射引起反向性心率变慢，血压出现双峰曲线。

【实验对象】

家兔。

【实验用品】

生物实验处理系统，压力换能器，动脉插管，兔手术台，哺乳动物手术器械，活动双凹夹，试管夹，铁支柱，三通管，刺激器电极，双极保护电极，注射器（1ml　3副，5ml、20ml各1副），有色丝线、纱布，脱脂棉花，20%氨基甲酸乙酯，生理盐水，1∶1　000肝素，1∶10　000去甲肾上腺素，1∶10　000肾上腺素，1∶10　000乙酰胆碱。

【实验步骤】

1．手术准备

（1）麻醉：动物称重后，用20%氨基甲酸乙酯5m1／kg［或1%戊巴比妥钠（2．5～3）ml／kg］由兔耳缘静脉缓慢注入（图3－13）。注射中注意观察动物肌张力、呼吸频率及角膜反射的变化，防止麻醉过深。

图3－13　兔耳缘静脉注射

（2）固定动物：将麻醉好的动物仰卧位固定于兔手术台上，颈部放正，必要时可在颈部下方垫一小垫，将颈部垫高，以便手术。

（3）分离颈部血管和神经：颈部剪毛，做长5～7cm的正中切口，分离皮下组织和浅层肌肉后，沿纵行的气管前肌和斜行的胸锁乳突肌间钝性分离，将胸锁乳突肌向外侧分开，即可见到深层位于气管旁的血管神经束，仔细辨认并小心地分离左侧的迷走神经和减压神经，下穿不同颜色的湿丝线备用，分离时特别注意不要过度牵拉，并随时用生理盐水湿润。然后分离双侧的颈总动脉，穿线备用（参见综合性实验8）。

（4）气管插管：在气管下穿线，于甲状软骨下1～2个环状软骨间用粗剪刀剪开气管的一半，并向下方做一纵切口，使切口呈倒“T”形。插入气管插管，并用备好的线固定（参见综合性实验8）。

（5）颈总动脉插管：参见综合性实验8。

2．仪器准备

（1）将压力换能器的输出端与三通管相连。其中三通管的一端连接动脉插管，用注射器将肝素通过三通管缓慢注入换能器和动脉插管内，将换能器和动脉插管内的空气排尽（注意：注入肝素前应保证换能器通过动脉插管与大气相通，否则注入肝素时将会使换能器内压力剧升而损坏换能器）。

（2）将压力换能器的输入端与生物实验处理系统的前面板CH1接口相连，将刺激电极插头与生物实验处理系统的前面板刺激器接口相连。

（3）调节参数。选择“实验模块”菜单中的“循环实验”菜单项，以弹出“循环实验”子菜单。在“循环实验”子菜单中选择“兔动脉血压调节”实验模块。放开动脉夹，记录动脉血压。根据信号窗口中显示的波形，再适当调节实验参数以获得最佳的实验效果。

【观察项目】

1．正常血压曲线　动脉血压随心室的收缩和舒张而变化。心室收缩时血压上升，心室舒张时血压下降，这种血压随心动周期波动称为“一级波”（心搏波），其频率与心率一致。此外可见动脉血压亦随呼吸而变化，吸气时血压先是下降，继则上升，呼气时血压先是上升，继则下降。这种波动叫“二级波”（呼吸波），其频率与呼吸频率一致。有时还可见到一种低频率（几次到几十次呼吸波为一周期）的缓慢波动，称为“三级波”，可能与心血管中枢的紧张性周期有关。

2．夹闭一侧颈总动脉　用动脉夹夹闭左侧颈总动脉5～10s，观察血压变化。

3．牵拉颈总动脉残端　手持右侧颈总动脉远心端的结扎线，或用止血钳夹住残端，向心脏方向轻轻拉紧，然后做有节奏的往复牵拉（2～5s），持续5～10s，注意勿拉脱结扎线，观察血压变化。

4．刺激减压神经　先用双极保护电极刺激完整的左侧减压神经，使用鼠标单击工具条上的“刺激”命令按钮，或者从“基本功能”菜单中选择“刺激”命令项中的“启动刺激”命令。观察血压变化（血压如不下降，应检查刺激器是否有输出或所刺激的是否为减压神经）。然后在神经游离段（应有1．5～2cm长）的中部做双重结扎，在两结扎线的中间剪断减压神经，以同样的刺激参数分别刺激其中枢端和外周端，观察血压变化。

5．刺激迷走神经　结扎并剪断左侧迷走神经，刺激其外周端，使用鼠标单击工具条上的“刺激”命令按钮，或者从“刺激”菜单中选择“启动刺激”命令。观察血压变化。

6．静脉注射去甲肾上腺素　由耳缘注射0．01%去甲肾上腺素0．2～0．3ml，观察血压变化。

7．静脉注射肾上腺素　由耳缘注射0．01%肾上腺素0．2～0．4ml，观察血压变化。

8．静脉注射乙酰胆碱　由耳缘注射0．01%乙酰胆碱0．2～0．3ml，观察血压变化。

【注意事项】

1．麻醉动物注射麻醉药时，要注意注入的速度，一般前1／3快速，中1／3中速，后1／3慢速并注意观察动物的角膜反射和呼吸。

2．分离暴露颈动脉鞘时，需注意保持血管神经的自然位置，以便判定减压神经。

3．操作切忌粗暴，随时用生理溶液湿润组织以保持活性。忌用金属器械触及、夹捏神经。

4．每项实验后，应等血压基本恢复并稳定后再进行下一项。

5．每次注射药物后应立即注入少量生理盐水，以防止药液残留在针头内及局部静脉中，影响下一种药物使用的效果。

【思考题】

1．正常血压的一级波、二级波及三级波各有何特征？其形成机制何在？

2．夹闭颈总动脉与牵拉颈总动脉残端的实验结果有何不同，如何联系起来推断出结论？

3．刺激完整的减压神经及其中枢端和外周端，血压各有何种变化？为什么？

4．比较去甲肾上腺素和肾上腺素对血压的影响有何不同，为什么？

5．动脉血压是如何保持相对稳定的？

6．实验结束前，可采用股动脉放血观察不同失血量对心血管活动的影响。

7．处死动物的方法有哪些？

（肖爱娇）