技术在器官移植方面的应用

受体对供体特异性HLA抗体一直以来都是器官移植的一大障碍，因为它们的存在不仅介导超急性排斥反应而且还可导致急性排斥反应。因此，HLA抗体的存在限制了异体抗原敏感患者对供体器官的需要，因而增加了等待移植的时间。在心脏、肝脏和肾脏异体移植后早期出现的并发症如急性排斥反应与移植前存在的异体免疫临床相关性迫切需要一种恰当的检测方法在器官移植前能了解受体对供体特异性体液免疫的功能状态。

目前有3种方法检测人类HLA抗体，但各有利弊。①补体依赖性细胞毒性试验（complete－ment－dependent　cytotoxicity，CDC）：它是最早用于检测HLA抗体的方法，迄今已30多年，它能检测依赖补体的HLA抗体，如HLA－IgG1、IgG3、IgM及IgG2a／b；但其敏感性低，且不能检测非补体依赖的HLA抗体，尽管许多研究表明，该类抗体与急性移植排斥反应有关。此外，其最大的缺点是非HLA特异性，也可检测非HLA自身抗体；②流式细胞技术（flow　cytometry，FCM）：该方法敏感性比CDC高10～250倍，可以识别供体细胞特异性免疫球蛋白抗体的各个亚型。然而不适合针对大量靶细胞HLA特异性的筛查，且也具非HLA特异性，有5%～10%假阳性；③酶联免疫法（ELISA）：该方法可以检测IgG的所有亚型、包括细胞毒性和非毒性HLA抗体，操作简便，重要的是它可以检测HLA抗体的特异性。不足之处在于受体血清不能与供体细胞进行交叉反应，以确定对供体特异免疫反应的能力。然而上述3种方法对于检测既往有异体免疫敏感史（pre－sensitized　history）而现在体内不存在任何异体抗体的移植患者无奈。这类人群因有多次输血或既往有异体移植失败或多次妊娠史体内曾经存在阳性异体抗体，在他们接受异体移植时，现有的检测方法只能显示他们对异体的免疫功能正常。但他们体内存在记忆B淋巴细胞，一旦受到相应HLA抗原的刺激则会唤起免疫反应，这不仅影响着移植的结果，甚至会出现危及患者生命的、与移植相关的并发症。因此，刺激记忆B淋巴细胞增殖、分化成浆细胞并建立一种特异性ELISPOT方法检测HLA抗体产生细胞是最佳手段。廖爱华等已建立了用ELISPOT技术检测人类HLA－类抗体的方法。