技术在器官移植中的应用

1．干细胞分选与应用　干细胞的主要来源是骨髓和动员的外周血采集物。分为造血干细胞和非造血干细胞（间充质干细胞，MSC）。人类造血干细胞的主要分选标志是CD34和CD133。间充质干细胞的分选方法目前多倾向于使用CD271及CD133做阳性富集，或者CD45／CD235a去除分选。

近年来研究发现，MSC具有免疫调节的作用，可以抑制异基因T细胞的增殖，并且这种作用不依赖于MHC，从而可能成为移植中跨越HLA障碍和防治GVHD的方法。可能是通过直接抑制异基因激活的T淋巴细胞的增殖，和淋巴细胞相互作用导致某种物质的释放，通过上调调节T细胞比例，间接抑制APC细胞成熟诱导T细胞的无反应性等作用机制，起到调节免疫的作用。且MSC可能在GVHD出现后应用仍然具有免疫抑制作用。间充质干细胞的广泛应用还有待于进一步研究和探讨。

2．调节性T细胞分选与应用　使用MACS技术可以很容易地分选得到高纯度调节性T细胞（Treg）。这种细胞是具有抑制自身免疫和免疫耐受作用的CD4＋CD25＋细胞。多项动物实验都证实，Treg细胞具有潜在的免疫调节作用，可以防止GVHD发生，促进异基因移植物在受者体内植活。Treg细胞的调节功能具有非细胞因子依赖性，仅仅需要T－T细胞间的直接接触，即Treg细胞依靠CTLA4／B7信号通路直接作用于异基因反应性T细胞，使其免疫无能后诱导出免疫耐受。

3．细胞因子分泌细胞的分选与应用　CMV感染是一个常见的移植并发症，其治疗至今是个难题。使用CMV　pp65蛋白体外刺激供者的外周血单个核细胞，然后使用一种特殊的MACS分选方法－细胞因子分泌细胞俘获和分选试剂盒或者联合使用抗CMV　tetramer－PE和抗PE微珠，就可以得到高纯度有高度活性的抗原特异性细胞因子分泌细胞。回输给受者，可用有效治疗CMV。

（肖　漓）

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