【实验目的】
学习摘除垂体的方法，检验腺垂体对生命活动的调节作用。
【实验原理】
腺垂体是动物的重要内分泌器官，腺垂体分泌的激素有：生长素、促甲状腺素、促肾上腺皮质激素、促性腺素、催乳素等。故垂体与机体的生长和甲状腺、肾上腺、性腺、乳腺的发育及其生理功能均有密切关系。
【实验对象】
大白鼠。
【实验用品】
手术器械一套，小撑开器，大白鼠手术台，牙钻（脚踏式开关），抽吸垂体吸引装置，小棉签，乙醚，精密天平秤，动物秤。
【实验步骤】
1．实验前2个月选择大白鼠24只分为两组，每组雌、雄各6只，实验时，将一组动物的垂体切除，另一组动物保留垂体作为对照。
2．咽喉旁法摘除垂体
（1）大白鼠用乙醚麻醉后取仰卧位固定在手术台上，头端向术者，自下腭到颈部沿正中线剪开皮肤暴露气管，用小撑开器撑开气管两侧的肌肉，在气管下段用针刺破一孔，动物通过这一小孔呼吸和吸入乙醚以利麻醉继续进行，并可避免因手术操作时压迫上呼吸道而致窒息。
（2）右手持小直镊轻将二腹肌与胸锁乳突肌走行方向分离，小镊子须与腭面成45°，分离时必须注意避开该处附近的颈动脉，然后将小镊子往内侧推进碰到头骨为止。如小镊子推进方向正确，碰到的骨头就是蝶骨，此时应立刻把左手所持弯镊子的尖端压拢，顺着直镊子的方向插入，并取出直镊子，使弯镊子尽量向大鼠头端方向牵拉。这时镊子移动的角度和牵拉的程度极其重要，以保证位置的准确，随后将小弯镊子慢慢撑开，用小棉签分离组织，暴露蝶骨。
（3）注意观察蝶骨和周围组织的关系：左右各突出一个圆形的耳泡，正中间有一个骨脊，它与蝶、枕骨缝相交成“人”字，交叉点是蝶鞍的底部。找到此点后，右手持牙钻柄（钻头大小要适当）放在交叉点上略偏头侧，钻头与骨面成直角，右足踏调速电动开关，牙钻转动并操纵钻头转动速度，迅速钻一小孔，孔的深度须适中，太深易损伤脑组织，太浅则不能达到目的。将钻头移去后，可见圆形脑垂体正在孔内。钻头位置稍有不正，将易钻破颅底静脉窦，引起大出血，影响动物存活率，但一般稍有出血，并无大妨碍，可将小棉签塞入片刻，即能止血。
（4）开动抽气机，右手持抽气装置上的吸管，对准钻孔，以示指压住吸管上的小孔，管内立即产生负压，即可将垂体吸出。再将吸管放入有水的烧杯中，垂体乃随水流入抽气装置中的缓冲瓶内，可见到圆形可破碎为二、三片的垂体组织。
（5）垂体吸出后，用小棉签立即插入小孔以止血，然后将肌肉位置复原，缝合皮肤。
（6）术后须小心护理，给予富有营养的食物和水，并维持环境温度在20℃左右。
【观察项目】
1．生长发育情况 自手术前1d起每3d称体重1次，把对照组和手术组动物体重绘成曲线。同时还要注意观察动物皮毛光泽和疏密情况及个体的大小。
2．其他内分泌腺重量及组织形态学的变化 在手术后第4周，从两组中各选出雌雄动物各两只，这8只动物再分为两组杀死后，其中一组4只动物取甲状腺、肾上腺、前列腺或卵巢等腺体，在精密天平秤上称准重量，按每100g体重计算并记录。然后将组织放在固定液内制成切片，检查各腺体组织形态的变化并记录。另一组4只动物做尸体解剖，比较对照组与去垂体组的个体大小，甲状腺、肾上腺、性腺等发育情况并记录下来，最后可用固定液固定，做成标本并长期保存。
3．用放射免疫（RIA）测定的方法测定去垂体组和对照组的内分泌腺的激素：
甲状腺：测定T3、T4。
肾上腺：测定皮质醇。
睾丸：测定睾酮。
前列腺：测定前列腺素。
卵巢：测定孕酮、雌二醇。
【注意事项】
1．避免因手术时压迫上呼吸道而窒息。
2．钻孔位置要准确，并避免出血。
【思考题】
1．讨论腺垂体对生命活动的调节作用。
2．试分析腺垂体－甲状腺、肾上腺、性腺3个靶腺轴之间的关系。
（伍庆华）
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