临床标本微生物的检验方法

1．血液标本检验方法

（1）培养基的选择。为提高阳性率通常先用增菌培养基培养。

（2）分离和鉴定。观察有细菌生长时或血培养仪阳性报警时，应做如下检验：①镜检，结果及时与临床联系；②转种血平板、巧克力平板、厌氧血平板或其他特殊培养基等分离培养后再进行鉴定；③同时做药敏试验，结果及时报告临床。

（3）报告方式。①阴性结果：7d报告无细菌生长。疑为亚急性细菌性心内膜炎、厌氧菌血症、布鲁菌病、真菌血症时，血培养连续培养2～3周，仍无细菌生长者报告阴性；②阳性结果：三级报告方式。

2．脑脊液标本检验方法 ①涂片镜检：3 000r／min离心15min。革兰染色、抗酸染色、墨汁染色等。电镜检查病毒颗粒。②分离培养：接种血平板、葡萄糖增菌肉汤、中国蓝琼脂平板或麦康凯琼脂平板、巧克力平板。结核菌接种米氏7H10培养基或罗－琴培养基。真菌培养接种沙氏培养基。病毒培养常用鸡胚接种、动物接种、细胞培养。③血清学检测抗原。

3．痰液标本检验方法 ①涂片：细菌用革兰染色、抗酸染色，隐球菌用墨汁染色，军团菌、支原体、病毒等用免疫荧光抗体染色。痰涂片革兰染色可判定痰标本的质量。合格标本应是含白细胞、脓细胞和支气管柱状上皮细胞较多，受污染的痰标本则是扁平上皮细胞较多。以白细胞＞25个／低倍视野，而扁平上皮细胞＜10个／低倍视野为合格标本。②分离培养：用无菌生理盐水将痰洗净，加入胰酶溶液使痰均质化。普通细菌培养用血平板、中国蓝琼脂平板或麦康凯琼脂平板、巧克力平板。其他细菌、真菌和病毒的培养用相应的培养基。

4．尿液标本检验方法

（1）培养基。普通细菌选用血平板、中国蓝琼脂平板或麦康凯琼脂平板。特殊细菌使用特殊、选择培养基。

（2）尿细菌定量培养。

（3）结果报告。①阴性：48h无细菌生长。②阳性：菌落计数、鉴定及药敏结果。革兰阴性杆菌＞105cfu／ml；革兰阳性球菌＞104cfu／ml，有诊断意义。＜104cfu／ml，多为污染。104～105cfu／ml，为可疑阳性。③尿路感染的细菌数＜105cfu／ml时多见于：应用抗菌药物，尿中细菌受到抑制；使用低敏感性药物；尿浓度变化大时及pH在5．0以下8．5以上；尿频；病原菌发育要求条件高时；采尿时外阴部消毒剂混入尿中。

5．粪便标本检验方法 普通致病菌如沙门菌、志贺菌等可选用SS琼脂平板、中国蓝琼脂平板或麦康凯琼脂平板。特殊细菌如弯曲菌、弧菌、厌氧菌等选择相应的选择性培养基。病毒可用细胞培养。