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湿法消化实验

时间:2022-02-13 理论教育 版权反馈
【摘要】:用湿法消化前处理测定蛋白质样品。加入强氧化剂,使蛋白质样品消化,而被测定含氮物质呈离子状态保存在溶液中。样品中若含有脂肪或糖较多时,消化过程易产生大量泡沫,为防止泡沫溢出瓶外,在开始消化时应用小火加热,并不断摇动;或者加入少量辛醇、液体石蜡或硅油消泡剂,并同时注意控制热源强度。

一、实验目的和原理

用湿法消化前处理测定蛋白质样品。加入强氧化剂(如浓硝酸、高氯酸、高锰酸钾等),使蛋白质样品消化,而被测定含氮物质呈离子状态保存在溶液中。

二、实验材料

硫酸铜硫酸钾、浓硫酸(所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制)。

三、操作步骤

(1)精密称取2.0g玉米粉样品,移入干燥的消化管中。

(2)加入0.2g硫酸铜、3g硫酸钾及20mL浓硫酸(或直接加入消化片1片)。

(3)将消化管分别放入消化架的孔内,置于消化炉上。

(4)接好排污管,打开抽气三通,使之处于吸气状态(注意三通接法)。

(5)再接电源,打开各控制开关,使其消化。

(6)在初始阶段,须注意观察防止试样飞溅(缓解方法:可在消化至飞溅时关机5min,再开机继续加热)。

(7)至液体呈蓝绿色澄清透明后(加消化片的液体最后呈无色),再继续消化15min。

四、注意事项

(1)消化不要用强火,应保持和缓沸腾,利用冷凝酸液将附在瓶壁上的固体残渣洗下并促使其消化完全。

(2)样品中若含有脂肪或糖较多时,消化过程易产生大量泡沫,为防止泡沫溢出瓶外,在开始消化时应用小火加热,并不断摇动;或者加入少量辛醇、液体石蜡或硅油消泡剂,并同时注意控制热源强度。

(3)若样品消化液不易澄清透明时,可将凯氏烧瓶冷却,缓缓加入30%过氧化氢2~3mL后再继续加热。

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