茶园土壤速效磷的测定

实验实训五　茶园土壤速效磷的测定

（0.5mol/LNaHCO₃浸提-钼锑抗比色法）

一、实训目的

土壤速效磷也称土壤有效磷，包括水溶性磷和弱酸溶性磷，其含量是判断土壤供磷能力的一项重要指标。测定土壤速效磷的含量，可为合理分配和施用磷肥提供理论依据。

本实训要求学生了解测定土壤速效磷的基本原理，掌握其测定方法。

二、实训的方法原理

用pH8.5的0.5mol/L的NaHCO₃作浸提剂处理土壤，由于碳酸根的存在抑制了土壤中的碳酸钙的溶解，降低了溶液中Ca²⁺浓度，相应提高了磷酸钙的溶解度。由于浸提剂的pH较高，抑制了Fe³⁺和Al³⁺的活性，有利于磷酸铁和磷酸铝的提取。此外，溶液中存在着OH-、HCO-、CO^2-等阴离子，也有利于吸附态磷的置换。用NaHCO作浸提剂提取的有效3₃₃磷与作物吸收磷有良好的相关性，其适应范围也广泛。

浸出液中的磷在一定的酸度下用硫酸钼锑抗还原显色成磷钼蓝，蓝色的深浅在一定浓度范围内与磷的含量成正比。因此，可以用比色法测定其含量。

三、实训仪器与配制试剂

（一）实训仪器

震荡机、分光光度计或光电比色计、天平（0.01g）、三角瓶（250mL）、容量瓶（50mL）、漏斗、无磷滤纸、移液管（10mL）等。

（二）配制试剂

1.0.5mol/L的NaHCO₃（pH8.5）浸提液

称取化学纯NaHCO₃42.0g溶于800mL蒸馏水中，以4mol/LNaOH溶液调节pH至8.5（用pH计测定），然后稀释至1000mL，保存在试剂瓶中。如果贮存期超过1个月，使用时应重新调整pH值。

2.无磷活性炭

将活性炭先用1∶1（V/V）的盐酸浸泡过夜，在布氏漏斗上抽滤，用蒸馏水冲洗多次至无Cl^-为止。再用0.5mol/LNaHCO₃溶液浸泡过夜，在布氏漏斗上抽滤，用蒸馏水洗尽NaHCO₃，检查至无磷为止，烘干备用。

3.7.5mol/L硫酸钼锑抗贮存液

在1000mL烧杯中加入400mL蒸馏水，将烧杯浸在冷水中，然后缓慢注入208.3mL浓硫酸（分析纯），并不断搅拌，冷却至室温。另称取分析纯钼酸铵20g溶于60℃的150mL蒸馏水中，冷却。再将硫酸溶液慢慢倒入钼酸铵溶液中，不断搅拌，最后加入0.5%酒石酸锑钾溶液1000mL，用蒸馏水稀释至1000mL，摇匀，贮存于棕色试剂瓶中，避光保存。

4.钼锑抗混合显色剂

称取1.50g抗坏血酸（左旋，旋光度+12～+22，分析纯）溶于100mL钼锑抗贮存液中，混匀。此试剂有效期为24h，宜用前配制，随配随用。

5.磷标准液

准确称取在105℃烘箱中烘干2h的分析纯KH₂PO₄0.2195g，溶于400mL蒸馏水中。加浓硫酸5mL，转入1000mL容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，摇匀。此溶液为50mg/L磷标准液，此溶液不易久贮。

6.磷标准曲线绘制

分别吸取50mg/L磷标准液0、1、2、3、4、5（mL）于50mL容量瓶中，各加入0.5mol/L的NaHCO₃浸提液1mL和钼锑抗显色剂5mL，除尽气泡后定容，充分摇匀，即为0mol/L、0.1mol/L、0.2mol/L、0.3mol/L、0.4mol/L、0.5mol/L的磷的系列标准液。30min后与待测液同时进行比色，读取吸光度值。再放在方格坐标纸上以吸光度值为纵坐标，磷mol/L为横坐标绘制成磷标准曲线。

四、操作步骤

（一）待测液的制备

称取通过1mm筛孔的风干土样5.00g置于250mL三角瓶中，加入一小勺无磷活性炭和0.5mol/L的NaHCO₃浸提液100mL，塞紧瓶塞，在震荡机上震荡30min，取出后立即用干燥漏斗和无磷滤纸过滤，滤液用另一只三角瓶盛接。同时作空白试验。

（二）测定

吸取滤液10mL（对含P₂O₅1%以下的样品吸取10mL，含磷高的可改为5mL或2mL，但必须用0.5mol/L的NaHCO₃补足至10mL）于50mL容量瓶中，加钼锑抗混合显色剂5mL，小心摇动。30min后，在721或722型分光光度计上用波长660nm（光电比色计用红色滤光片）比色，以空白液的吸收值为0，读出待测的吸光度值。

五、结果计算

土壤速效磷（mg/L）=待测液×待测液体×积分取倍数/烘干土重

式中　待测液（mg/L）——从标准曲线上查得待测液浓度；

　　　待测液体积——50mL；

　　　积分取倍数——浸提液总体积（mL）为吸取浸出液体积（mL）的倍数（100/10）；

　　　烘干土重——风干土重乘以水分系数。

六、注意事项

①钼锑抗混合显色剂的加入量要准确。

②加入混合显色剂后，即产生大量的CO₂气体。由于容量瓶口小，CO₂气体不易逸出，在混匀的过程中试液易外溢，导致测定误差。因此，必须小心慢慢加入，同时充分摇动排出CO₂，以避免CO₂的存在影响比色结果。

③活性炭一定要洗至无Cl^-反应，否则不能使用。

④此法温度影响很大，一般测定应在20～25℃的温度下进行。如室温低于20℃，可将容量瓶放在30～40℃的热水中保温20min，取出冷却后进行比色。

⑤0.5mol/L的NaHCO₃测土壤有效磷分级可参考实训表4.3。

实训表4.3

七、作业

1.填写实训报告。

2.为什么报告有效磷测定结果时必须同时说明所用的测定方法？

3.如要获得比较准确土壤速效磷的测量结果，在测定过程中应注意哪些问题？