常用玻璃器皿的洗涤与包扎

任务1　常用玻璃器皿的洗涤与包扎

1．常用玻璃器皿的洗涤

1）洗涤液的配制

常用的洗涤液是重铬酸钾（或重铬酸钠）的硫酸溶液，是一种强氧化剂，去污能力很强，实验室用来清洗玻璃和瓷质器皿上的有机物质，但切不可用于金属和塑料器皿。

洗涤液一般分为浓溶液和稀溶液两种，配方如下：

浓溶液　　重铬酸钾（工业用）　　　　40g

蒸馏水160mL

浓硫酸（工业用）800mL

稀溶液重铬酸钾（工业用）50g

蒸馏水850mL

浓硫酸（工业用）100mL

配制方法都是将重铬酸钾先溶解于蒸馏水中，可慢慢加热，使其溶解，待冷却后缓慢加入浓硫酸，边加边搅动。

配好后的洗涤液应是棕红色或橘红色，储存于有盖容器内备用。此液可反复使用，直至溶液变成青褐色时表示失去效用。

注意：①盛洗涤液的容器应始终加盖，以防止氧化变质；②玻璃器皿清洗前，应尽量干燥，避免洗涤液被稀释；③若需加快作用速度，可将洗涤液加热至40～50℃进行洗涤；④当器皿上带有大量有机物质时，不可直接用洗涤液洗涤，应尽量先行清除后再用，否则洗涤液很快会失效；⑤洗涤液有强腐蚀性，玻璃器皿浸泡时间不可过长，否则会使玻璃变质，若溅于桌椅上，应立即用水冲洗或用湿布擦去，若皮肤或衣服上沾有洗涤液，应立即用水冲洗，然后再用碳酸钠溶液（苏打水）或氨水洗。

2）玻璃器皿的洗涤

实验中所使用的玻璃器皿清洁与否，直接影响微生物检验的结果。经常会由于器皿的不清洁或被污染而造成较大的实验误差，甚至会出现相反的检验结果，玻璃器皿的清洗应根据实验目的、器皿的种类、盛放的物品、洗涤剂的类别和洁净程度等不同而有所不同。

（1）新玻璃器皿的洗涤。

新购置的玻璃器皿含游离碱较多，应先用2%的盐酸浸泡数小时（＞4h），再用自来水冲洗，最后用蒸馏水洗2～3次，于烘箱内烘干。

（2）带油污玻璃器皿的处理。

凡带有凡士林或石蜡油的玻璃器皿，在未洗刷前需尽量除去油腻，可先放在5%的苏打水内煮两次，再用肥皂和热水洗刷。

（3）使用过玻璃器皿的处理。

移液管及滴管的处理：一般用后的器皿应立即用清水或蒸馏水浸泡洗涤，有时放置太久会增加洗涤困难。带菌的移液管或滴管，应立即投入5%的石炭酸溶液或0．25%新洁尔灭水溶液中浸泡数小时或过夜，经高压蒸汽灭菌后，再用自来水冲洗及蒸馏水冲净。

带菌玻片及载片的处理：已用过的带有活菌的载片或盖片可先浸在5%石炭酸溶液或1∶50的新洁尔灭溶液中消毒，然后用镊子取出，立即用自来水冲洗干净，再用蒸馏水冲洗数次，待干后浸于95%乙醇中保存备用，使用时在火焰上烧去乙醇即可。

含有培养基的玻璃器皿：可先将培养基刮去，或将其用水蒸煮，待琼脂熔化后趁热倒出，然后用水洗涤。若培养皿内含有致病菌，应先经高压蒸汽灭菌，然后将培养物倒去再进行洗涤。

洗涤后的玻璃器皿内壁的水应均匀分布成一薄层，无条纹和水珠。凡遇有传染性材料的器皿，洗涤前应先经高压蒸汽灭菌。

2．常用玻璃器皿的包扎

为了使玻璃器皿在灭菌后仍保持无菌状态，各种玻璃器皿均需先经过包扎。

1）吸管的包扎

在干燥吸管的上端距管口约0．5cm处，塞入一小段1～1．5cm长的棉花，目的是避免将外界或嘴中杂菌吹入管内，或不慎将菌液吸出管外。塞入棉花的量要适宜，松紧适当，如过紧，吹吸液体太费力；过松，吹气时棉花会下滑。棉花不宜露在吸管口的外面，多余的棉花可用酒精灯火焰烧去。

准备4～5cm宽的长纸条，将纸条一段折起，再将吸管尖端放在折起纸条的外面，与纸条呈45°折叠包住尖端，一手捏住管身，一手将吸管压紧在桌面上，向前滚动，以螺旋式包扎，剩余的纸条折叠打结（图2－6）。将若干支吸管扎成一束，或将包好的吸管放在特制的铁皮筒内，加盖密封后等待灭菌。

图2－6　吸管的包扎方法

2）空试管和锥形瓶的包扎

灭菌之前，试管口和锥形瓶的瓶口均需先塞好棉花塞（或硅胶泡沫塞、塑料帽）。棉花塞起过滤作用，避免空气中的微生物进入试管或锥形瓶。

要求使棉花塞紧贴玻璃壁，无缝隙，不能过松，过松易掉落和污染，过紧则易挤破管口且不易塞入。棉花塞的长度不少于管口直径的两倍，约2／3塞进管口（图2－7）。将若干支试管用棉绳扎在一起，棉花塞外面部分包裹牛皮纸，再用绳子以活结扎紧。锥形瓶则每个单独需用双层的牛皮纸包扎棉塞。

图2－7　棉塞的要求

（a）正确的式样；（b）头部太大；（c）头部过小；（d）整体太松；（e）头部过松，底部过紧

棉塞一般用普通棉花，不能用脱脂棉，因为脱脂棉容易吸水变湿，造成污染，且价格也贵。制作方法：①根据所做棉塞的大小撕一块较平整的棉花；②把长边的两头各叠起一段，目的是叠齐、加厚；③按住短边把棉花卷起来，卷时两手要捏住中间部分，两头不要卷得太紧；④卷成棉卷后，从中间折起并拢，插入试管或锥形瓶；⑤检查一下插入部分的松紧度、长度及外露部分的长度、粗细和结实程度。此外还有另一种做法，如图2－8所示。

3）培养皿的包扎

培养皿可用废旧报纸或牛皮纸包扎，一般以5～8套培养皿包成一包，包好后干热或湿热灭菌。或不用纸包扎，直接放入特制的金属筒（不锈钢或铁皮）筒内，加盖干热灭菌。包扎后的培养皿经灭菌后，方可使用，使用时需在无菌室中打开取出培养皿（图2－9）。

图2－8　棉塞的制作过程

图2－9　装培养皿的金属筒

（a）内部框架；（b）带盖外筒