【摘要】：将靶向GFP基因的双链RNA转入小鼠的畸胎瘤细胞，诱发细胞内RNAi作用，显著抑制了报告基因的表达。未分化的胚胎细胞中，上述防御病毒的机制存在缺陷，双链RNA长度对阻断基因表达的特异性影响不大。Tuschl等发现，21个核苷酸的双链RNA能够诱发哺乳动物细胞内的RNAi机制，同时不会激活细胞内的干扰素系统。图13－4 不同长度双链RNA在哺乳动物细胞中的作用
在细胞中的研究_分子医学导论
一、RNAi在细胞中的研究
小鼠的胚胎细胞中存在RNAi。将靶向GFP基因的双链RNA转入小鼠的畸胎瘤细胞，诱发细胞内RNAi作用，显著抑制了报告基因的表达。但＞30个核苷酸的双链RNA进入哺乳动物的成体细胞后，会非特异地阻断其他基因的表达。过长的双链RNA进入哺乳动物成体细胞后，能激活病毒防御机制和RNA酶L（RNase L），产生非特异的mRNA降解（图13－4）。未分化的胚胎细胞中，上述防御病毒的机制存在缺陷，双链RNA长度对阻断基因表达的特异性影响不大。Tuschl等发现，21个核苷酸的双链RNA能够诱发哺乳动物细胞内的RNAi机制，同时不会激活细胞内的干扰素系统。他们合成了以荧光素酶的mRNA为靶分子的21个核苷酸的双链RNA，将它和荧光素酶的表达质粒通过脂质体共转染NIH3T3、COS－7、Hela S3和293细胞中，结果报告基因的表达被抑制了90％。报告基因得到的结果不能完全说明细胞内的情况，他们又合成了以细胞内源性基因laminA／C为靶目标的双链RNA，这个双链RNA也特异地抑制laminA／C的表达，抑制率达到90％以上。
图13－4 不同长度双链RNA在哺乳动物细胞中的作用
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