2.3.1 普通果蝇形态及生活史的观察
一、实验目的
1.了解果蝇生活史中各个阶段的形态特征。
2.区别雌、雄蝇和几种常用突变型的主要性状。
3.掌握实验果蝇的饲养管理以及实验处理方法和技术。
二、实验原理
普通果蝇为双翅目昆虫，具完全变态。生长迅速，每12天左右即可完成一个世代，繁殖能力较强，在短时间内即可获得多数子代，有利于遗传学的分析；容易饲养，饲料如玉米粉等简便易得，常温下容易生长、繁育；突变性状多达400个以上，而且多数是形态变异，便于观察。因此在遗传学研究中得到广泛应用，积累了许多典型材料。
果蝇的食物主要是酵母，凡是能使酵母发酵的基质都能作为培养基，其中最常用、效果最好的是玉米粉培养基。
三、实验材料、用具及药品
材料：饲养的野生型和几种常见的突变型果蝇。
用具：双筒解剖镜、放大镜、麻醉瓶、培养瓶、白瓷板、新毛笔、恒温培养箱。
药品：乙醚、酒精等。
四、实验步骤
1.生活史的观察（图2-3）
卵：成熟的雌蝇交尾后（2～3天）将卵产在培养基的表层。用解剖针的针尖在果蝇培养试管内沿着培养基表面挑取一点培养基，将其置于载玻片上，然后滴上一滴清水，用解剖针将培养基展开后，放在显微镜下仔细观察。果蝇的卵为椭圆形，长约0.5mm，腹面超扁平，前端伸出的触丝可附着在培养基表层而不陷入深层。
幼虫：果蝇的受精卵经过一天的发育即可孵化为幼虫。幼虫在培养基内及瓶壁上都有，培养基内的幼虫一般要小。这是因为果蝇的幼虫从一龄幼虫开始经两次蜕皮，形成二龄和三龄幼虫，随着发育而不断长大，三龄幼虫往往会爬到瓶壁上化蛹，其长度可达4～5mm。幼虫一端稍尖为头部，黑点处为口器。幼虫在培养基内和瓶壁上蠕动爬行。
图2-3 果蝇生活史
蛹：幼虫经过4～5天的发育开始化蛹。一般附着在瓶壁上，颜色淡黄。随着发育的继续，蛹的颜色逐渐加深，最后为深褐色。在瓶壁上看到的几乎透明的蛹，是羽化后遗留的蛹的空壳。
成虫：刚羽化出来的果蝇虫体较长，翅膀未完全展开，体表未完全几丁质化，所以呈半透明乳白色。随着发育，身体颜色加深，体表完全几丁质化。羽化出来的果蝇在12小时后开始交配，成体果蝇在25 ℃条件下的寿命为37天。
2.果蝇的麻醉
在进行杂交和子代观察、统计时需对果蝇进行麻醉。操作要点：拔去麻醉瓶口上的橡皮塞，将橡皮塞底部粘一团脱脂棉，滴数滴乙醚（注意不能太多，以免乙醚流入瓶内），再塞上橡皮塞。将果蝇培养管在海绵板上敲击几下，拍打管壁，使果蝇集中在底部。然后迅速拔去培养管棉塞，插入麻醉瓶口，轻轻拍打培养管，使果蝇全倒入麻醉瓶，然后迅速盖上麻醉瓶的盖子。麻醉到一定程度后，将果蝇倒在白瓷板上。当果蝇翅膀上翘45度时，表示已经死亡。
3.成蝇的外部形态和常见的突变类型观察
续表
4.雌雄果蝇的鉴别
图2-4 雄性果蝇的性梳
5.果蝇培养用玉米粉培养基的配置（果蝇培养基配方见下表，200mL）
五、作业
在解剖镜下辨别雌雄果蝇的外部形态并完成下表。
观察几种常见果蝇突变型的外部性状。
2.3.2 果蝇唾液腺染色体的制片与观察
一、实验目的
1.练习果蝇唾液腺的分离方法。
2.掌握唾液腺染色体的制片技术。
3.观察了解果蝇唾液腺染色体的形态特征。
二、实验原理
1.双翅目昆虫（果蝇）幼虫期的唾液腺细胞很大，其中的染色体称唾液腺染色体，相当于一般普通染色体的100～150倍，又称巨大染色体。
2.在幼虫发育过程中，唾液腺染色体仍进行复制，但细胞只生长不分裂，从而产生多线染色体。多线染色体经染色后，出现深浅不一、宽窄不同的横纹，这些横纹的数目和位置是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征。如果染色体缺失、重复、倒位、易位等结构变异时，很容易在唾腺染色体上识别出来。
3.多线染色体的特征：a.巨大；b.体细胞配对，所以染色体只有半数（n＝4）；c.各染色体的异染色质多着丝粒部分相互靠拢形成染色中心；d.横纹有深浅、疏密的不同，各自相应排列，这意味着基因的排列。
三、实验材料和用品
材料：黑腹果蝇的三龄幼虫。
用品：显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸、生理盐水、 1%醋酸洋红。
四、实验步骤
1.载玻片置于显微镜下，上面滴加一滴生理盐水，放上果蝇幼虫（有一钝尾和带黑色口器的尖头，可根据其在盐水中爬行方向确定头部），两手各拿一枚解剖针，左手解剖针按住幼虫的后端1/3，右手解剖针按住头部（尽量靠近口器）用力后拉，把头部从身体拉出，唾液腺随之而出。（一对双叉形透明的囊状腺体，如图2-5所示）。
图2-5 果蝇唾液腺
图2-6 果蝇唾液腺染色体
2.除去幼虫其他组织部分，把唾液腺周围脂肪组织（不透明）剥离干净，然后将多余生理盐水吸走，滴一滴醋酸洋红在载玻片上。
3.染色10 分钟，盖上盖玻片，用滤纸轻压一下吸去多余的染色液，然后平放在桌子上，用大拇指适当均匀用力压住，并横向揉几次（勿使盖玻片移动，用力和揉动是一个方向，不能来回 揉！）。
4.显微镜观察，先在低倍镜下观察，找到分散好的染色体图像，如图2-6，再高倍镜观 察。
用显微镜可以看到四对染色体，第一对染色体（X-）组成一个长条，第二和第三对各自组成了具有左右两臂的染色体对，它们都以中部的着丝区聚集，而第四对染色体很小，分布在着丝区呈点状或盘状。这样，从压好的片子中便可看到五条弯曲展开的染色体臂（X-、ⅡL、ⅡR、ⅢL、ⅢR），和一个点状的第四染色体对，它们在着丝区构成染色中心并向四周伸开。
五、 实验结果
1.将你制作和观察到的果蝇唾液腺染色体图片拍照2～3张，并保存。
2.讨论：
① 果蝇唾腺染色体的特征；② 查阅资料，了解唾腺染色体的遗传学意义。
免责声明：以上内容源自网络，版权归原作者所有，如有侵犯您的原创版权请告知，我们将尽快删除相关内容。
