高压蒸汽灭菌器

任务2　高压蒸汽灭菌器

高压蒸汽灭菌器是利用加压的饱和蒸汽对物品、器械、药液等灭菌的设备，适用于医疗卫生、食品等行业实验室使用。高压蒸汽灭菌器具有自带蒸汽的双层结构，门体采用自封式密封，外观采用矩形封闭装饰，配合轻触式按键控制面板，使整台设备的外形美观实用，易于清洁（图1－5）。灭菌器的控制应用了自动控制技术，能精确地控制灭菌温度及时间，以数字显示，整个灭菌过程全自动控制，操作方便，减少了操作失误，灭菌效果好。每锅耗电7～9度，环境温升小于2℃。

图1－5　高压蒸汽灭菌器

1．灭菌锅的使用说明

（1）手提式灭菌锅需有人看守，因为没有压力和温度的自动控制装置，在温度或者压力达到所需条件时（一般为121℃、0．1MPa），需要切断电源，停止加热，当温度下降时再开启电源开始加热，使温度维持在恒定的范围之内。因为温度太低达不到灭菌效果，太高可能会发生危险，所以操作较麻烦。

（2）灭菌前应该加水至相应刻度，若太少，会引起干烧或者爆裂。

（3）尽可能加去离子水，使产生的水垢少些。

（4）灭菌后物品的无菌检验方法是将灭菌后物品放在37℃恒温箱培养24h，若无杂菌生长，则说明灭菌效果较好。

（5）高压蒸汽灭菌适用范围广，实验室和医疗机构均广泛采用。

2．高压灭菌的原理

在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在0．1MPa的压力下，锅内温度达121℃，在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。

3．注意事项

（1）完全排除锅内空气，使锅内全部是蒸汽，灭菌才能彻底。高压灭菌放气有几种不同的做法，但目的都是要排净空气，使锅内均匀升温，保证灭菌彻底。常用方法是：关闭放气阀，通电后，待压力上升到0．05MPa时，打开放气阀，放出空气，待压力表指针归零后，再关闭放气阀。再通电后，压力表上升达到0．1MPa时，开始计时，维持压力0．1～0．15 MPa　20min。

（2）到达保压时间后，即可切断电源（有的高压蒸汽灭菌器达到设定温度及时间后可自动关闭），压力降到0．05MPa后可缓慢放出蒸汽。应注意不要使压力降低太快，防止压力差过大，使容器中的液体冲出瓶外。当压力降到零后，才能开盖，取出培养基，摆在平台上，以待冷凝。不可久不放气，引起培养基成分变化，以致培养基无法摆斜面。一旦放置过久，由于灭菌锅内有负压，盖子不易打开，此时需将放气阀打开，待内外压力平衡后盖子便可打开。

（3）对高压灭菌后不变质的物品，如无菌水、栽培介质、接种用具等，可以延长灭菌时间或提高压力。而培养基要严格遵守保压时间，既要保压彻底，又要防止培养基中的成分变质或效力降低，不能随意延长时间。

4．操作步骤

不同规格的产品步骤有区别，此处以手提灭菌锅为例。

（1）加水：首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。

（2）装物：放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。注意不要装得太挤，以免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果。锥形瓶与试管口端均不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包装纸而浸湿棉塞。

（3）加盖：将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内，再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿漏气。

（4）排气、升压、保压：接通电源，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。待冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。当锅内压力升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。灭菌条件为：0．1MPa，121．3℃，20min。

（5）降压：待时间达到要求后，切断电源停止加热，待压力降至接近“0”时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。若压力未降到“0”时过早打开排气阀，会使容器内压力下降的速度比锅内慢而使得容器内液体冲出容器之外，造成棉塞沾染培养基而发生污染。

（6）取物、无菌检查：将取出的灭菌培养基放入37℃恒温箱培养24h，若无杂菌生长，即可证明是无菌的。