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非特异性反应素检测

时间:2022-05-11 理论教育 版权反馈
【摘要】:检测所用的抗原由从牛心肌中提取的心磷脂、胆固醇和纯化的卵磷脂组成,即类脂质抗原,测定患者血清中的反应素。这些成分溶于无水乙醇中,在加入水后,胆固醇析出形成载体,心磷脂和卵磷脂在水中形成胶体状包裹在其周围,形成胶体微粒。本法仅为非特异性血清学过筛试验,阴性结果不能排除梅毒感染,阳性结果需进一步做抗梅毒螺旋体抗体试验确认。

一、非特异性反应素检测

检测所用的抗原由从牛心肌中提取的心磷脂胆固醇和纯化的卵磷脂组成,即类脂质抗原,测定患者血清中的反应素。其主要方法为甲苯胺红不加热血清试验(toluidine red unheated serum test,TRUST)

【原理】

试剂中的心磷脂作为抗原与抗体发生反应,卵磷脂可加强心磷脂的抗原性,胆固醇可增强抗体的敏感性。这些成分溶于无水乙醇中,在加入水后,胆固醇析出形成载体,心磷脂和卵磷脂在水中形成胶体状包裹在其周围,形成胶体微粒。将此抗原微粒混悬于甲苯胺红溶液中,加入待测血清,血清中的抗体与之反应后,可出现肉眼可见的凝集块。

【试剂与器材】

TRUST试剂、待测血清、阳性对照、阴性对照、反应卡等。

【操作方法】

(1)将TRUST试剂和待测血清置室温平衡10 min。

(2)将待测血清(无需灭活处理)、阴性对照和阳性对照分别加至反应卡的样本圈内,每圈l滴(50μL)。

(3)轻轻摇匀抗原试剂,垂直滴加1滴抗原于样本圈内。

(4)旋转摇动卡片8 min,肉眼观察结果。

【结果判断】

(1)阴性反应:呈粉红色均匀分散沉淀物。

(2)阳性反应:出现粉红色凝集块,根据凝集块大小记录+~++++。

(3)阳性反应若需定量检测,可将待测血清用生理盐水倍比稀释后,按定性方法进行。

【注意事项】

(1)试验需在室温中操作,以保证结果的稳定性和重复性

(2)待测血清需新鲜、无污染,否则可能出现假阳性或假阴性结果。

(3)在规定的时间内及时观察结果。

(4)检样及废弃物应视为生物危险品

【临床应用】

本法仅为非特异性血清学过筛试验,阴性结果不能排除梅毒感染,阳性结果需进一步做抗梅毒螺旋体抗体试验确认。

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