本研究将探讨ACEI/D基因多态性与冠心病（心绞痛）辨证分型的关系。
●临床资料
中医辨证分型标准参照《中药新药临床研究指导原则》及《上海市中医病证诊疗常规》。病例纳入标准：符合西医冠心病、稳定型劳累性心绞痛诊断，符合中医痰瘀交阻、气阴两虚、阴虚阳亢证分型标准者。共收集自上海市黄浦区中心医院中医心血管专科就诊患者115例，及47名外滩地段医院健康体检人员为研究对象，共计入选162例。
●方法
应用聚合酶链反应（PCR）技术，检测自观察对象血白细胞中提取的基因组DNA中ACE基因第16内含子Alu重复序列。①基因组DNA的提取：从血白细胞中提取基因组DNA。提取的DNA经电泳及紫外分光光度仪检测，纯度及浓度均符合PCR技术要求，无明显降解。PCR产物为490bp片断者，表明受检对象的ACE基因为插入型纯合子（insertion/insertion，II型）；产物为190bp片段者，表明ACE基因为缺失型纯合子（deletion/deletion，DD型）；上述两种片段同时出现者，为缺失/插入型杂合子（deletion/insertion，ID型）。②PCR引物设计：由上海生工生物工程公司合成，引物序列为5'CTGGAGACCACTCCCATCCTTTCT3'及5'克ATGTGGCCATCACATTCGTCAGAT3'。PCR产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳及溴乙啶染色后，在紫外线透射下观察结果。
●结果
1.ACE基因型PCR扩增结果 位于ACE基因第16内含子可扩增出两种长度片段，即490bp的为插入（I）片段和190bp的缺失（D）片段。仅有490bp为II型，仅有190bp为DD型，两种均有的为ID型。
2.冠心病组与正常对照组基因型比较 基因型（II、DD、ID）在冠心病组与正常对照组的分布存在差异，其中冠心病组DD基因型频率、D等位基因频率明显高于正常对照组（P＜0.05）。
3.不同证型组基因型比较 基因型（II、DD、ID）在冠心病各辨证分型组分布不同。与痰瘀交阻组比较，气阴两虚组与阴虚阳亢组II基因型频率、I等位基因频率明显增高（P＜0.05），而DD基因型频率、D等位基因频率差异无统计学意义（P＞0.05）。与阴虚阳亢组比较，气阴两虚组II基因型频率、I等位基因频率、DD基因型频率、D等位基因频率差异均无统计学意义（P＞0.05）。
●讨论
关于冠心病中医证型与ACE基因I/D多态性的关系，国内少见报道。本项目对冠心病与健康人群及冠心病患者中不同证型间ACE基因I/D多态性的相关性研究显示，ACEI/D基因多态性与冠心病（心绞痛）发病相关，且其中II基因型可能与其辨证分型中阴虚型相关。
积极开展冠心病的中医辨证规律研究，尤其是其与相关基因多态性分布关系的研究，将为辨证客观化，进一步提高中医药疗效及阐明中医药作用机制提供新思路。本研究结果提示，ACE基因多态性分布在同病异证中存在一定差异，说明疾病的转归和预后可能与基因多态性分布有关，I等位基因可能是冠心病尤其阴虚型发生的内在因素。中医辨证施治获效是否同时呈现基因型或基因表达改变，尚需进一步研究。
（赵国定，周培芳，蔡征宇，苏瑾，肖梅芳，宋海萍，田英敏.上海中医药杂志，2008年第7期）
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