【摘要】:如果强行压出气泡,可能会使脂滴移位。
(一)操作方法
1.厚5~10μm冷冻组织切片,收集于装有蒸馏水的小烧杯。
2.用玻璃弯钩钩出切片,在50%~70%乙醇中稍洗。
3.将切片钩入染液(上述三种方法中的任一种染液)浸染5~10min。
4.在50%~70%乙醇中洗去多余染液。
5.Mayer苏木素细胞核染色2min。
6.水洗5~10min。
7.挑选完整的切片,先浸入50%~70%乙醇,再放入蒸馏水,此时切片由于乙醇张力,能平整地漂于水面,将切片捞到载玻片上,擦干周边水分。
8.甘油明胶或水性封固剂封固。
(二)结果
依据选用染色方法,结果各异。
(三)注意事项
1.用于脂类染色的组织不能用含乙醇固定液固定,必须用福尔马林或福尔马林钙等固定。
2.用于脂类染色的切片只能是冷冻切片,不能是石蜡包埋切片。
3.封固应在湿片状态进行,不能等到切片烤干或自然晾干。
4.如果切片出现过多的气泡,不能强行将其压出,应将切片放入水中,退去盖片,再行封固。如果强行压出气泡,可能会使脂滴移位。
5.染液遇水易发生沉淀,染色时应尽量减少切片水含量,进入染液前应尽量擦干组织切片周围水分。
6.配好染液应密封保存,以减少与空气接触发生氧化或挥发、沉淀。
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