检查感染病毒最好的方法

本节热门考点

1.人类免疫缺陷病毒为包膜球状病毒，基因组为两条相同的正链RNA。

2.传染源主要是HIV无症状携带者和艾滋病病人，传播途径主要是通过性接触、输血、器官移植、注射等途径及垂直传播。

3.微生物学检查包括检测病毒抗体、检测病毒抗原、检测病毒核酸和病毒分离等。

人类免疫缺陷病毒

本病毒为艾滋病病人的病原体，系引起细胞病变的灵长类反转录病毒之一，属反转录病毒科慢病毒亚科。

（一）形态结构、复制和变异

1.形态结构　病毒呈球形，直径100～120nm，电镜下可见一致密的圆锥状核心，内含病毒RNA分子和酶（反转录酶、整合酶、蛋白酶），病毒外层囊膜系双层脂质蛋白膜，其中嵌有gp120和gp41，分别组成刺突和跨膜蛋白。囊膜内面为P17蛋白构成的衣壳，其内有核心蛋白包裹RNA。

2.复制

（1）病毒RNA→→RNA：DNA→→双链DNA→→双链DNA整合到宿主细胞基因组中形成前病毒→→RNA。

（2）RNA→→mRNA→→子代病毒蛋白；RNA→→子代病毒的基因组。

（3）子代病毒蛋白+子代病毒的基因组→→装配成核衣壳→→以出芽的方式释放。

3.变异　HIV的显著特点之一是它的高度变异性，HIV的反转录酶无校正功能、错配性高是导致HIV基因频繁变异的重要因素。env基因最易发生突变，导致其编码的包膜糖蛋白gp120抗原变异。gp120表面抗原变异有利于病毒逃避免疫清除，也给HIV疫苗研制带来困难。

根据env基因序列的异同可将目前全球流行的HIV-l分为A、B、C、D、E、F、H和O共8个亚型。

（二）传染源和传播途径、感染过程和致病机制

1.传染源和传播途径　HIV感染者是传染源，曾从血液、精液、阴道分泌液、眼泪、乳汁等分离得HIV。传播途径有：

（1）性传播：通过男性同性恋之间及异性间的性接触感染。

（2）血液传播：通过输血、血液制品或没有消毒好的注射器传播，嗜毒者共用不经消毒的注射器和针头造成严重感染，我国云南边境静脉嗜毒者感染率达60%。

（3）母婴传播：包括经胎盘、产道和哺乳方式传播。

2.致病机制　HIV选择性地侵犯带有CD4分子的细胞，主要有T4淋巴细胞、单核巨噬细胞、树突状细胞等。细胞表面CD4分子是HIV受体，通过HIV囊膜蛋白gp120与细胞膜上CD4结合后由gp41介导使毒穿入易感细胞内，造成细胞破坏。

其机制尚未完全清楚，可能通过以下方式起作用。

（1）由于HIV包膜蛋白插入细胞或病毒出芽释放导致细胞膜通透性增加，产生渗透性溶解。

（2）受染细胞内CD-gp120复合物与细胞器（如高尔基体等）的膜融合，使之溶解，导致感染细胞迅速死亡。

（3）HIV感染时未整合的DNA积累，或对细胞蛋白的抑制，导致HIV杀伤细胞作用。

（4）HIV感染细胞表达的gp120能与未感染细胞膜上的CD4结合，在gp41作用下融合形成多核巨细胞而溶解死亡。

（5）HIV感染细胞膜病毒抗原与特异性抗体结合，通过激活补体或介导ADCC效应将细胞裂解。

（6）HIV诱导自身免疫，如gp41与T4细胞膜上MHCⅡ类分子有一同源区，由抗gp41抗体可与这类淋巴细胞起交叉反应，导致细胞破坏。

（7）细胞程序化死亡。

3.感染过程　艾滋病病人由于免疫功能严重缺损，常合并严重的机会感染，常见的有细胞（鸟分枝杆菌）、原虫（卡氏肺囊虫、弓形体）、真菌（白色念珠菌、新型隐球菌）、病毒（巨细胞病毒、单纯疱疹病毒、乙型肝炎病毒），最后导致无法控制而死亡，另一些病例可发生Kaposis肉瘤或恶性淋巴瘤。此外，感染单核巨噬细胞中HIV呈低度增殖，不引起病变，但损害其免疫功能，可将病毒传播全身，引起间质肺炎和亚急性脑炎。

（三）微生物学诊断

1.抗体检测　主要有酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫荧光试验（IFA）。ELISA用去污剂裂解HIV或感染细胞液提取物作抗原，IFA用感染细胞涂片作抗原进行抗体检测，如果发现阳性标本应重复一次。为防止假阳性，可做Western blot（WB，蛋白印迹法）进一步确证。

2.抗原检测　用ELISA检测P24抗原，在HIV感染早期尚未出现抗体时，血中就有该抗原存在。由于P24量太少，阳性率通常较低。现有用解离免疫复合物法或浓缩P24抗原，来提高敏感性。

3.核酸检测　用PCR法检测HIV基因，具有快速、高效、敏感和特异等优点，目前该法已被应用于HIV感染早期诊断及艾滋病的研究中。

4.病毒分离　常用方法为共培养法，即用正常人外周血液分离单个核细胞，加PHA刺激并培养后，加入病人单个核细胞诊断及艾滋病的研究中。

（四）防治原则

1.广泛地开展宣传教育，普及防治知识，认识本病传染源、传播方式及悲惨结局。

2.建立HIV感染和艾滋病的监测系统，掌握流行动态。对高危人群实行监测，严格管理艾滋病病人及HIV感染者。

3.对供血者进行HIV抗体检测，确保输血和血液制品安全。

4.加强国境检疫，防止本病传入。