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脂肪组织衍生干细胞的诱导分化

时间:2022-04-17 理论教育 版权反馈
【摘要】:目前,应用脂肪组织衍生干细胞诱导神经分化的研究不胜枚举,但是相关的研究进展却似乎止步不前。依据文献报道,p75 也是脂肪组织衍生干细胞的标志物,S100基因也是在诱导前和诱导后的脂肪组织衍生干细胞都有表达。因此,Sox10在识别脂肪组织衍生干细胞是否真正分化为施万细胞样细胞时是个有用的标志物。图15-1 从皮下脂肪组织诱导施万细胞的示意图。

目前,应用脂肪组织衍生干细胞诱导神经分化的研究不胜枚举,但是相关的研究进展却似乎止步不前。目前的研究热点是怎样将骨髓衍生间充质干细胞和脂肪组织衍生干细胞诱导分化成施万细胞,有关这方面的研究文章很多。大多数研究在诱导过程中,应用经几代传代后的脂肪组织衍生干细胞以及含有10%胎牛血清、核黄酸、福斯考林、碱性成纤维细胞生长因子和β调蛋白-1或者1%胎牛血清、N2添加剂、毛喉素和β调蛋白-1的混合培养液(图15-1)。其他研究则应用原代细胞的球体培养,再将这些球体形成细胞分离出来,在上述诱导培养液中诱导分化成施万细胞。细胞经诱导后,展示典型的施万细胞形态学特点,并表达施万细胞标志物,例如S100、神经胶质酸性纤维蛋白和p75。然而和前面提到的研究一样,大多数的研究都有一定的局限性,即仅仅发现了细胞形态学的改变,基因表达的证据很少。依据文献报道,p75 也是脂肪组织衍生干细胞的标志物,S100基因也是在诱导前和诱导后的脂肪组织衍生干细胞都有表达。因此,研究者们需要寻找更多特异性更强的标志物来识别不同来源和不同分化程度的施万细胞。例如,Sox10只在神经脊干细胞上表达,在神经分化后表达下调,但是在施万细胞和黑色素细胞中保持不变。因此,Sox10在识别脂肪组织衍生干细胞是否真正分化为施万细胞样细胞时是个有用的标志物。至于用于施万细胞和神经胶质细胞的更多标志物,例如Sox10、p75、S100、Krox20、L1、周围神经髓鞘蛋白(peripheral myelin protein22,PMP22)、髓磷脂蛋白脂质蛋白(myelin proteolipid protein/PLP/DM20)、表皮生长因子受体Ⅱ(epidermal growth factor receptor,ErbB2)、血小板衍生生长因子受体(plateletderived growth factor receptor,PDFGr-aa)、A2B5、P0、人脑髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)应该与脂肪组织衍生干细胞、球体形成细胞和天然施万细胞进行比较性评估。Radtke等(2009)报道在共同培养时,诱导的施万细胞可以刺激背根部神经节的神经元。如果考虑到脂肪组织衍生干细胞和诱导的施万细胞都能够强烈表达胶质细胞衍生的神经营养因子、脑组织衍生的神经营养因子、神经生长因子和纤毛神经营养因子(ciliary neurotrophic factor,CTNF)的能力,这一现象就不足为奇。

图15-1 从皮下脂肪组织诱导施万细胞的示意图。第一步,将从皮下脂肪组织中新鲜分离的细胞培养在无血清的球体培养环境中。第二步,10天后,将细胞松解为单个细胞,在10%FBS、DMEM/F12溶液中将细胞在可附着表面上进行单层培养。第三步,细胞经再次诱导,10天后形成球体。第四步,诱导分化为施万细胞

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