刚地弓形虫抗体检测

弓形虫病（toxoplasmosis）又称弓形体病，是由刚地弓形虫（toxophasma gondii）所引起的人畜共患病，广泛分布于世界各地。由猫与其他宠物传染人；还可以通过摄入生的或未煮熟的肉类引起感染，尤其是猪、羊肉。临床上有先天性和获得性弓形虫病两类。成人感染一般多为无症状带虫状态，当机体免疫功能受损时，隐性感染可活化，导致重症弓形虫病，多见于获得性免疫缺陷综合征（艾滋病）、白血病、恶性肿瘤、器官移植等免疫功能缺损，弓形虫病可引起各种症状，如高热、肌痛、关节疼痛、淋巴结增大等，主要侵犯眼、脑、心、肝、淋巴结等，易呈全身播散性，预后亦差。单纯淋巴结增大型预后良好。眼部弓形虫病常复发。先天性弓形虫病是妊娠期初次感染者，弓形虫可通过胎盘感染胎儿，孕早期感染者可引起流产、死胎、胚胎发育障碍或畸形胎儿；妊娠中晚期感染者，可引起宫内胎儿生长迟缓和一系列中枢神经系统损害（如无脑儿、脑积水、小头畸形、大脑钙化灶、智力障碍等）、眼损害（如无眼、单眼、小眼等）以及内脏的先天损害（如食管闭锁）等，严重威胁胎儿健康。其危险性较未感染孕妇大10倍，影响优生，严重先天性感染预后多恶劣，是人类先天性感染中最严重的疾病之一。

孕妇勿与猫狗等密切接触，防止猫粪污染食物、饮用水和饲料（猫和猫科动物是弓形虫的终宿主，感染的猫粪便里排出囊合子，一般持续1周至20天，这段时间是传染期）。不吃生的或不熟的肉类和生乳、生蛋等。

实验室检查常取患者血液、骨髓或脑脊液、胸腔积液、腹水、痰液、支气管肺泡灌洗液、眼房水、羊水等作涂片，或淋巴结、肌肉、肝、胎盘等活组织切片，作瑞氏或姬氏染色镜检可找到滋养体或包囊，但阳性率不高。亦可作直接免疫荧光法检查组织内弓形虫。还可用免疫学方法检测宿主细胞内的病原（速殖子或包囊），在血清及体液中的代谢或裂解产物（循环抗原），是早期诊断和确诊的可靠方法。国内外学者建立了McAb-ELISA以及McAb与多抗的夹心型ELISA法检测急性患者血清循环抗原，其敏感度为能检出血清中0．4μg／ml的抗原。人体感染弓形虫后，机体可产生特异性抗体，血清中可查到此抗体。临床上常用IFT、ELISA法等检测弓形虫特异性IgM、IgG抗体来进行早期诊断。所用抗原主要有速殖子可溶性抗原（胞质抗原）和胞膜抗原。前者的抗体出现较早，而后者的抗体出现较晚。胶体金免疫层析法可快速检测人血清中弓形体-IgM、IgG抗体，作为POCT的方法较为实用。

【检测原理】　胶体金免疫层析法。采用特异性基因重组抗原，结合金标免疫层析试验，以高度特异灵敏的IgM、IgG捕获法定性检测人血清中弓形体-IgM、IgG抗体。

【适应证】　孕前或孕期优生优育常规检查；先天性弓形虫病诊断；免疫功能受损的有关疾病，如恶性淋巴瘤、白血病、艾滋病、肿瘤的放化疗等疑为弓形虫继发感染。

【标本采集】　血清。

【参考范围】　IgM、IgG抗体均阴性。

【操作方法】　取出检测卡，做好标记，每个加样窗内分别加入80μl血清，于15min内观察结果。

【结果判读】

1．阴性结果　在实验卡上只在质控区（C区）内见到粉红色条带，这说明实验操作可行，检测结果为阴性。

2．阳性结果　如果在实验卡的质控区（C区）和实验区（T区）分别出现两条清晰的条带，这说明实验结果为阳性，样品中有相应抗体。条带之间的颜色差异不影响结果解释。

3．不确定结果　如果在实验卡的质控区内没有出现条带，不论实验区是否有条带，该结果应视为无效。建议使用新试剂，按照说明书重新实验。

【临床意义】

1．弓形虫感染较普遍，我国普通人群中弓形虫抗体的阳性率为0．3%～11．8%，平均达5．3%；美、英的成年人感染率为16%～40%。血清特异性IgM抗体阳性，提示急性感染，对早期诊断弓形虫病有意义。检查特异性IgG抗体的动态变化对慢性感染或既往感染诊断有一定价值。

2．优生优育检查。孕前检查孕妇IgG抗体均阳性，提示已获保护性免疫；如孕前检查孕妇IgG抗体均阴性，孕期呈阳性，则胎儿有感染弓形虫的危险，孕妇应自怀孕开始每6周复查一次，如果抗体滴度逐渐升高，胎儿感染的危险性增大。妊娠初期感染弓形虫者应做人工流产，中、后期感染者应予治疗。值得注意的是，在首次感染后IgM抗体可维持数年，因此应全面考虑。

3．供血者检查弓形虫抗体阳性者不应供血；器官移植者血清抗体阳性者亦不宜使用。

【局限性】

1．在受累宿主的抗体筛查时，结果解释应当慎重。免疫抑制的个体和免疫亢进的个体其抗体反应有所不同。本测试存在误检或漏检的可能。

2．初次感染不足5d的患者，其被检测的特异性抗体还不存在，本次检测会阴性。未满周岁的婴儿标本可检测到母体的抗体，所以不宜单独用此实验做婴儿既往感染或免疫状态的评估。