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荧光显微镜的应用

时间:2022-04-13 理论教育 版权反馈
【摘要】:幼稚或成熟的细胞核均含有丰富的DNA,所以在荧光显微镜下发出黄绿色的荧光,而细胞质内含RNA,发出的荧光呈橙黄色。细胞愈幼稚含RNA愈多,胞浆嗜碱性愈强,发出之荧光也愈强,幼稚细胞及瘤细胞的核仁中含RNA,所以也发出橙色荧光。目前荧光显微镜检查主要用于血液病,如各种类型的白血病及肿瘤的检查。此外,荧光显微镜检查还应用于肾或皮肤活体组织检查,乳腺性类固醇受体检查等。

荧光显微镜是利用一个高发光效率的点光源,经过滤色系统发出一定波长的光作为激发光,激发标本内的荧光物质,使之发射出各种不同颜色的荧光,再通过物镜和目镜的放大观察荧光图像。这样在强烈的对称背景下,即使荧光很微弱也易辨认,敏感性高,主要用于细胞结构和功能以及化学物质的分布、定位等的研究。

常用于细胞学检查的荧光物质是吖啶橙(A.O)。细胞被A.O染色后,经紫外线照射,细胞核与细胞质显示出不同颜色的荧光。幼稚或成熟的细胞核均含有丰富的DNA,所以在荧光显微镜下发出黄绿色的荧光,而细胞质内含RNA,发出的荧光呈橙黄色。细胞愈幼稚含RNA愈多,胞浆嗜碱性愈强,发出之荧光也愈强,幼稚细胞及瘤细胞的核仁中含RNA,所以也发出橙色荧光。

目前荧光显微镜检查主要用于血液病,如各种类型的白血病及肿瘤的检查。镜检时先在涂片标本上加荧光液,以玻片覆盖进行观察,根据细胞核、核仁、胞质发出荧光的颜色、特点与强度来判断细胞的分化程度,对血液病及肿瘤的细胞学诊断有一定帮助。

此外,荧光显微镜检查还应用于肾或皮肤活体组织检查,乳腺性类固醇受体检查等。例如,对肾小球疾病的检查可行肾穿刺,将标本迅速制成3~5μm厚的冷冻切片,分别以各种FITC荧光素标记抗体(包括IgG、IgA、IgM、IgE各种免疫球蛋白抗体)、补体系统各种成分(如经典途径激活的C1、C4、C3、C5和旁路途径激活的降解素、B因子等)以及抗纤维蛋白抗体等,然后进行结合,用荧光显微镜观察各种免疫球蛋白、补体和纤维蛋白原在肾小球内沉积的形式和分布情况,并了解补体通过何途径而激活,从而对肾小球的疾病做出正确的诊断。

在皮肤水疱性疾病、红斑性狼疮等做荧光显微镜检查有重要诊断价值。

在乳腺癌,若雌孕激素受体阳性,表明其为激素依赖性乳腺癌,用内分泌治疗可取得良好的效果,并可预测出患者有较好的预后

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