肺炎支原体抗体检测

肺炎支原体（mycoplasma pneumoniae，MP）是引起呼吸道感染的一种病原体，可引起气管炎、支气管炎、毛细支气管炎和肺炎。支原体是最小的可独立生存的微生物，习性与细菌相近，无细胞壁。肺炎支原体感染的血清学诊断方法有ELISA、冷凝集试验、补体结合试验、间接血凝试验等。

【测定方法】

1．ELISA 是诊断肺炎支原体感染常用的血清学方法，检测IgM和IgG抗体。此法敏感性高，快速、经济，为目前诊断MP感染的可靠方法。

2．免疫荧光法 特异性强。

3．补体结合试验（CF） 主要检测IgM抗体。

4．间接血凝试验 主要测IgM抗体。此试验操作简便，敏感度略高于补体结合试验，特异性尚不理想。

5．冷凝集试验 是检测患者血清中冷凝集素的一种非特异性试验。肺炎支原体引起的原发性非典型肺炎患者血清中常会出现冷凝集素（自身抗体）。主要为IgM型，其方法是将患者的稀释血清与O型红细胞在4℃下做凝集试验，在37℃则不能凝集红细胞。Garrow建立的快速方法更简便。其方法为0．2ml全血＋0．2ml3．8%枸橼酸钠混合，值0～4℃冰箱中15～30s取出，倾斜试管观察凝集情况。如呈粗大絮状为阳性。

6．PCR检测 检测支原体DNA。检测痰液、肺及支气管灌洗液、咽拭子标本中的MP。

【参考范围】

1．ELISA检测IgM和IgG抗体定性实验：阴性。

2．免疫荧光法检测IgM和IgG抗体定性实验：阴性。

3．补体结合试验：急性期和恢复期双份血清，效价呈4倍增长者，或单份血清效价≥1∶64～1∶128者

4．间接血清试验：测IgM抗体。感染发病后7天出现阳性，10～13天达高峰，12～26周初见降低。

5．冷凝集试验：≤1∶16。

有33%～76%肺炎支原体感染者为阳性（效价≥1∶64）。效价越高或双份血清呈4倍以上升高，肺炎支原体近期感染的可能性越大。

6．DNA低于最低检出限。

【临床应用价值】

1．用ELISA捕捉法，以抗P1McAb检测标本中肺炎支原体分子量43kD多肽或190kD的P1蛋白，3h可完成试验，特异性高，敏感性为104CFU／μl标本。

2．免疫荧光法检测IgM和IgG抗体特异性强。

3．补体结合试验。急性期和恢复期双份血清，效价呈4倍增长者，或单份血清效价≥1∶64～1∶128者，80%的病例表明近期有肺炎支原体感染。缺点：它主要检测IgM抗体，故初次感染时出现阳性，再次感染时常不出现阳性反应。该试验敏感性与特异性仅达90%左右。值得注意的是，在老年病人中，CF试验阴性尚不能排除肺炎支原体感染。

4．间接血凝试验。主要测IgM抗体。发病后7d出现阳性，10～13d达高峰，12～26周降低。特异性差，肺炎支原体和生殖道支原体之间存在着抗原交叉反应。

5．冷凝集试验是检测患者血清中冷凝集素的一种非特异性试验。

6．支原体DNA阳性有助诊断。

【影响因素】

1．支原体抗体检测注意，常规分离血清，如果7内完成检测，血清置2～8℃保存，否则冻存-20℃保存。

2．支原体DNA检测的痰液、咽拭子标本可立即测试，也可保存在-20℃待测，保存期6个月。标本运送时应采用0℃冰壶。

（荣　嵘）