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实时荧光定量(-

时间:2022-04-06 理论教育 版权反馈
【摘要】:同时实时荧光PCR扩增仪提供了实时、联线地监控PCR产物扩增的功能,可有效地分辨假阴性或假阳性,确保结果的准确性。有研究者认为,PCR定量检测外周血中BKVDNA含量对BKN诊断的阳性预测值可达75%,是预测BKN的独立危险因子。国内于珍等通过应用实时定量PCR监测B细胞恶性肿瘤患者造血干细胞移植后的IgH水平,研究结果证实,实时定量PCR检测IgH基因重排动态监测MRD对B细胞恶性肿瘤具有预后判断和治疗指导意义。

1.移植术后巨细胞病毒感染 人类巨细胞病毒感染是肾移植术后最常见的感染之一,其中10%~30%可发展成CMV病。real-time PCR检测CMV-DNA不仅可达到早期定量诊断的目的,而且在30min内可完成扩增,整个检测过程不超过2.5h。由于real-time PCR扩增过程中采用了密封的微细管系统,可避免PCR期间及PCR之后产物的污染,另外real-time PCR反应体系中还加入了UNG酶,可以最大程度地减少假阳性的发生率。同时实时荧光PCR扩增仪提供了实时、联线地监控PCR产物扩增的功能,可有效地分辨假阴性或假阳性,确保结果的准确性。由于real-time PCR可以定量检测CMV-DNA,所以可用其研究预测CMV感染症状发作的阈值及监测病毒药物的疗效。

2.肾移植术后BK病毒感染 BKV为多瘤病毒家族(polyomaviruses)亚型之一,是一种DNA小颗粒病毒。健康人群有BKV隐性感染史者较为普遍,一般无明显临床症状。肾移植术后患者处于免疫抑制状态时,潜伏于体内的BKV再度激活并大量复制,导致部分患者出现BKN,引起移植肾功能严重损害,甚至移植肾失功。早期诊断、处理BK病毒感染可以使移植物丢失的发病率明显降低。有研究者认为,PCR定量检测外周血中BKVDNA含量对BKN诊断的阳性预测值可达75%,是预测BKN的独立危险因子。

3.监测造血干细胞移植后的IgH水平 随着造血干细胞移植(HSCT)被引入B细胞恶性肿瘤的治疗,患者的无病存活率和总存活率得到了显著的提高,但仍有相当比例的患者在经历一段时间的缓解后由于残留肿瘤细胞的持续存在而复发。因此对微小残留病(MRD)的动态监测对B细胞恶性肿瘤HSCT后疾病进展状态的评估及治疗时机的选择具有重要意义。国内于珍等通过应用实时定量PCR监测B细胞恶性肿瘤患者造血干细胞移植后的IgH水平,研究结果证实,实时定量PCR检测IgH基因重排动态监测MRD对B细胞恶性肿瘤具有预后判断和治疗指导意义。

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