消化道平滑肌生理特性

【实验目的】

1．学习家兔离体小肠标本制作方法。

2．观察哺乳动物胃肠平滑肌运动的一般特性。

3．观察某些因素对离体小肠平滑肌活动的影响。

【实验原理】

在整个消化道中，除口、咽、食管上端和肛门外括约肌是骨骼肌外，其余部分都是由平滑肌组成的。消化道平滑肌的特性与骨骼肌不同，其兴奋性较骨骼肌为低，具有自动节律性、较大的伸展性，对牵张、温度和化学刺激比较敏感。胃肠平滑肌的收缩反应主要由副交感神经控制。肌细胞膜上富含M胆碱能受体，M受体激动剂和拮抗剂均可明显影响其收缩反应。本实验观察离体小肠平滑肌在模拟内环境（离子成分、晶体渗透压、酸碱度、温度、氧分压等方面类似于内环境）中的活动。同时研究某些神经、体液等因素对消化道平滑肌自动节律性、伸展性和对化学物质、温度改变等生理特性的影响。

【实验对象】

家兔。

【实验用品】

哺乳类动物手术器械，生物信号采集处理系统，恒温平滑肌槽或麦氏浴槽，氧气瓶，螺旋夹，张力换能器（量为25g以下），烧杯，温度计，乳胶管，乐氏液，1∶10　000肾上腺素，1∶10　000乙酰胆碱，1mol／L氢氧化钠溶液，1∶10　000阿托品。

【实验步骤】

1．麦氏浴槽或恒温平滑肌槽的准备

（1）麦氏浴槽：将麦氏浴槽置于水浴装置内，水浴装置中水的温度恒定在38～39℃，在麦氏浴槽内盛38～39℃乐氏液，温度计悬挂在浴槽内，用以监测温度的变化。氧气瓶经乳胶管缓慢向浴槽底部通氧气，调节乳胶管上的螺旋夹，控制通氧气速度，使氧气气泡一个接一个地通过中心管，为乐氏液供氧（图3－18）。

（2）恒温平滑肌槽：在恒温平滑肌槽的中心管加入乐氏液，外部容器中加装温水，开启电源加热，浴槽温度将自动稳定在38℃左右。将浴槽通气管与氧气瓶相连接，调节橡皮管上的螺旋夹，使气泡一个接一个地通过中心管，为乐氏液供氧。

2．离体小肠标本制作　用木槌猛击兔头枕部，使其昏迷后，迅速剖开腹腔，以胃幽门与十二指肠交界处为起点，先将肠系膜沿肠缘剪去，再剪取20～30cm肠管。肠段取出后，置于38℃左右乐氏液内轻轻漂洗，在肠管外壁用手轻轻挤压以除去肠管内容物。当肠腔内容物洗净后，用38℃左右的乐氏液浸浴，当肠管出现明显活动时，将其剪成约3cm长的肠段。实验时，取出一段长3～4cm的肠段，用线结扎其两端，迅速将小肠一端的结扎线固定于通气管的挂钩上，另一端固定于张力换能器上。适当调节换能器的高度，使肠段勿牵拉过紧或过松。调节通气橡皮胶管上的螺旋夹，使气泡逐个地逸出至浴管内，以供给标本足够的氧气。

3．连接实验仪器装置　张力换能器接到生物信号采集处理系统第1通道上，记录离体小肠平滑肌的收缩曲线。

图3－18　离体肠段灌流装置

4．打开计算机，启动生物信号采集处理系统，点击菜单“实验模块”，按计算机提示逐步进入消化道平滑肌的生理特性的实验项目。参数设置见表3－9（可根据实验实际情况调整各参数）。

表3－9　仪器参数设置表

【观察项目】

1．自动节律性收缩曲线　描记一段离体小肠平滑肌的自动节律性收缩曲线。注意基线的水平，收缩曲线的基线升高，表示小肠平滑肌紧张性升高；相反，收缩曲线的基线下移，表示紧张性降低。同时应观察收缩曲线的节律、波形、频率和幅度。

2．温度的作用　将浴槽中的乐氏液更换成25℃乐氏液，观察收缩曲线的节律、波形、频率和幅度。再更换成42℃乐氏液，观察小肠平滑肌收缩曲线的变化。最后再更换成38℃乐氏液，待小肠平滑肌的收缩曲线恢复正常后，再进行以下各项实验（均在38℃条件下进行）。

3．乙酰胆碱　用滴管向浴槽内滴1∶10　000乙酰胆碱溶液2滴，观察小肠平滑肌活动的变化。待作用明显后，立即从浴槽排水管放出含有乙酰胆碱的乐氏液，加入预先准备好的38℃乐氏液，如此反复冲洗3次，以洗涤或稀释残留的乙酰胆碱，使达到无效浓度。待小肠平滑肌的收缩曲线恢复至对照水平时，再进行下一项试验（以下各项均以同样方法进行洗涤）。

4．阿托品　用滴管向浴槽内滴入1∶10　000阿托品2～4滴，观察小肠平滑肌活动的变化。待作用明显后，再加入1：10　000乙酰胆碱溶液2滴，观察小肠平滑肌的收缩曲线有无变化。

5．肾上腺素　在浴槽中加入1∶10　000肾上腺素溶液2滴，观察小肠平滑肌活动的变化。

6．盐酸　在浴槽中加1mol／L盐酸溶液2滴。观察小肠平滑肌的反应。待效果明显后立即更换新的乐氏液。

7．氢氧化钠的作用　在浴槽中加1mol／L氢氧化钠溶液2滴，观察小肠平滑肌的反应。待效果明显后立即更换新的乐氏液。

【注意事项】

1．在加药之前应先准备好38℃乐氏液，以备实验中更换用液。

2．每次实验效果明显后，应立即更换浴槽内的乐氏液，并冲洗2～3次，以免平滑肌出现不可逆反应。

3．实验过程中应力求保持乐氏液的温度稳定、液面的高度固定、通氧速度恒定。实验中可根据平滑肌的反应曲线改变各药液的加入量，实验效果明显后，更换乐氏液要快，以免平滑肌出现不可逆反应。

【思考题】

1．胃肠平滑肌有哪些生理特性？

2．阿托品、乙酰胆碱、肾上腺素对小肠平滑肌的收缩曲线有何影响？根据哺乳类动物小肠平滑肌的神经支配及神经递质的知识，讨论这些药品引起小肠平滑肌收缩曲线改变的机制。

3．温度、酸碱度改变对小肠平滑肌收缩曲线有何影响？请讨论小肠内理化环境与小肠平滑肌生理特性间的关系。

4．加入阿托品后再加入乙酰胆碱对小肠平滑肌的收缩曲线各有何影响？为什么？如将加药顺序颠倒，小肠平滑肌的收缩曲线将如何改变？为什么？

（肖爱娇　喻松仁）