医院内环境微生物学监测的目的是随时了解医院内环境表面、各种物体表面、医务人员手以及室内空气等的污染情况、菌谱的分布和耐药菌的变迁等情况。掌握这些情况，对于医院感染管理非常重要，这是医院感染管理的基本工作之一。
医院微生物学监测是通过正确的采样方法，选取有代表性的部位采集标本，运用科学的微生物检验技术，来观察医院内环境和各种物体上微生物污染量、种类、分布、耐药菌谱及其动态变化，以便有针对性地采取措施，控制和降低污染，达到预防和控制医院内感染的目的。
（一）监测的时机
1.定期常规监测 依照医院感染管理规范要求，每1～3个月监测1次，每次监测不要求全面，但一定要有代表性，可反映出医院卫生学状况并能作出科学的结论。
2.针对性监测 发生医院感染流行特别是暴发流行时的监测，这种监测愈早愈好，要围绕流行区域对可能引起传播的媒介都应该列入监测范围，必须找出感染病原和传播途径，便于切断。
3.环境变动时监测 医院乃至一个病房的搬迁、粉刷、装修等，对新的环境包括外环境要作全面的微生物学监测并对原场所带来的物品要做卫生学处理并通过监测才可搬进新的环境。
（二）基本原则
1.严格执行国家统一标准方法 包括设计方法、采样方法、检验方法和统计报道方法。
2.采取标本要有代表性 医院内环境的污染属于均匀污染，选取采样部位要有代表性，要考虑物体表面的不同性质、所处的位置、区分出污染区、半污染区和清洁区。
3.要有足够的标本量 采样标本必须要有一定的数量，标本数越多越好，每种物品最少不得少于10个标本，否则没有统计学意义。
4.做好设计，选取好目标 每次监测应做设计，按设计要求采取数据，便于监测资料的统计分析。另外，设计对监测目标做出明确规定，使得监测能够得到科学的数据、正确的结论、能写出完整的监测报道。
（三）采样方法
1.准备 实施采样之前首先要准备好采样器材，如无菌棉拭子（最好用竹竿柱状棉拭）、采样规格板、灭菌采样液、涉及到化学消毒剂还要准备中和剂、无菌器材。
2.物体表面采样 对于平整的物体，每次选取4个区域，将5cm×5cm的规格板放于采样部位，取1支棉拭子在10ml采样液的试管内浸湿，于管壁上挤压一下，于规格板内区域均匀涂抹往返8次，每次转动棉拭子。然后以无菌操作方式将采样的棉拭子头剪断并落入采样液试管内，待检验。
3.不规则物品采样 对于无法用棉拭子采样的物品，可分别不同情况以件、重量或体积为采样单元，如纸张、布制品等可每个样品取2g，放入20～50ml采样液内。手和身体其他部位的采样取无菌棉拭子在5～10ml采样液的试管内浸湿，于管壁上挤压一下，将棉拭子贴于手指屈面指根部向指尖往返涂抹2次，每次转动棉拭子，直到五指全部采完。然后以无菌方式将采样棉拭子头剪入采样液的试管内待检验。其他部位如鼻咽部，伤口周围等以此类推。
（四）标本检验
1.检验项目 对于医院内环境所采集的标本一般应检验细菌总数、细菌分类检验、真菌检验、HBsAg检验以及某些特殊项目检验。
2.检验时机 环境标本采集应于采样结束当时进行检验，因为标本在采样液内有的细菌会繁殖，也有的细菌会死亡。特殊情况下，标本在室温下存放亦不得超过2h，在4℃冰箱内放置不得超过4h应进行检验。
3.检验步骤 见图22-1。
图22-1 总菌数检验步骤
活菌计数可以用0.03mol／L磷酸盐缓冲液或在其中加入中和剂作为稀释液，用普通营养琼脂作培养液，采用表面涂抹法或倾注法均可（具体方法请参阅本书生监测章节）。分类培养应根据不同细菌的特殊要求选择各自特殊培养液和培养条件。HBsAg检测可采用酶联免疫方法和固相放射免疫方法。
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