衣原体及其检验

1．衣原体

（1）生物学性状：衣原体是一群体积较小，能通过细菌滤器，细胞内专性寄生，并有独特发育周期的原核细胞型微生物。

①原体：外有胞壁，内含核质，为成熟的衣原体，姬姆萨染色呈紫色，Macchiavello染色呈红色，无繁殖能力，有高度感染性。

②网状体（始体）：无胞壁，内无核质，有纤细网状结构，姬姆萨和Macchiavello染色均蓝色，为衣原体发育周期的繁殖型，不能自胞外存活，无感染性。

③发育周期：原体与易感细胞表面特异受体吸附，进入细胞形成吞噬小泡，后增大为网状体，8h后，网状体构成各种形状的包涵体，18～24h后，网状体浓缩形成原体，后随宿主细胞破裂而出，再感染新易感细胞，开始新的发育周期。每个发育周期需40～72h。

④抗原成分：抗原性相当复杂，有属、种、型等特异性抗原。

⑤分离培养特性：专性细胞内寄生，绝大多数能在鸡胚卵黄囊中生长繁殖，也可在传代细胞中培养。

⑥抵抗力：衣原体抵抗力弱，沙眼衣原体35～37℃48h左右失去活性，不耐热，50℃，30min或56～60℃，5～10min可杀死，耐寒，冰冻条件下数年仍有活性，0．1%甲醛或0．5%石炭酸溶液24h杀死沙眼衣原体，2%来苏儿仅需5min，对四环素、青霉素、红霉素、螺旋霉素、利福平较敏感。

（2）沙眼衣原体的临床意义

①沙眼：主要通过眼－眼或眼－手－眼进行直接或间接接触传播。

②包涵体结膜炎：婴儿经产道时可致包涵体结膜炎，眼结膜炎是致盲的主要原因。

③泌尿生殖道感染：是经性接触传播引起的非淋菌性泌尿生殖道感染的主要病原，男性尿道炎最常见的病因之一，女性可引起尿道及生殖道炎症，也可与妇女不孕症有关。

④性病淋巴肉芽肿：由沙眼衣原体LGV生物亚种L血清型引起，主要通过性接触传播，引起腹股沟淋巴结炎为特征的性病，又称第四性病。

2．衣原体的微生物检验 ①姬姆萨（Giemsa）染色：原体紫红色，始体蓝色，包涵体深紫色。沙眼衣原体包涵体密度低，鹦鹉热和肺炎衣原体包涵体呈深密度。②碘液染色：沙眼衣原体包涵体可被碘液染成深褐色，呈阳性。鹦鹉热和肺炎衣原体碘染色阴性。③酶免法检测抗原：可检测临床标本中的可溶性抗原，能在几小时内完成。④核酸检测：构建特异性引物或探针，利用PCR、核酸探针技术进行检测，具有属特异性。⑤分离培养：均可用鸡胚卵黄囊和组织细胞培养，鹦鹉热衣原体常用小鼠分离。a．鸡胚卵黄囊接种。b．细胞培养：目前沙眼衣原体多用McCoy细胞，鹦鹉热衣原体多用Hela 229细胞系进行培养，肺炎衣原体适合用HEP－2和HL细胞系培养。可以用细胞生长抑制剂抑制宿主细胞生长达到较好的培养效果。c．小白鼠接种：主要用于鹦鹉热衣原体的分离，沙眼衣原体不敏感。⑥检测抗体：用补体结合试验、微量免疫荧光法、酶免法检测抗体。