（一）过氧化酶染色
1．原理 血细胞内的过氧化酶（POX）分解H2O2，释出初生态氧，使无色联苯胺氧化成蓝色联苯胺，后者进一步变成棕黑色化合物，沉着于胞质内。
2．正常血细胞的染色反应 嗜酸性粒细胞为强阳性，单核细胞系统呈阴性或弱阳性。淋巴细胞系统、红细胞系统、巨核细胞系统、嗜碱性粒细胞、浆细胞、组织细胞呈阴性。
3．临床意义 帮助鉴别急性白血病的类型：①急性粒细胞白血病时，白血病细胞多呈强阳性反应；急性单核细胞白血病时呈弱阳性或阴性反应；急性淋巴细胞白血病，原始和幼淋巴细胞则呈阴性反应。②小型原始粒细胞和原始淋巴细胞区分时，POX阳性者为小型原始粒细胞，阴性者为原始淋巴细胞。③急性早幼粒细胞白血病与急性单核细胞白血病鉴别时，急性早幼粒细胞白血病的白血病细胞呈强阳性反应。④异常组织细胞的POX呈阴性反应，白血病性幼单核细胞和单核细胞呈弱阳性反应。
（二）过碘酸－雪夫反应
1．原理 过碘酸能将血细胞内的糖类物质氧化生成醛基，醛基与雪夫试剂中的无色品红结合，形成紫红色化合物。
2．正常血细胞的染色反应 ①原粒细胞为阴性反应，自早幼粒细胞至中性分叶核粒细胞均呈阳性反应，随细胞的成熟，阳性反应程度渐增强。②嗜酸性粒细胞中颗粒本身不着色，颗粒之间的胞质呈红色；嗜碱性粒细胞中的嗜碱颗粒呈阳性。③幼红细胞和红细胞均呈阴性反应。④单核细胞、巨核细胞和血小板呈阳性反应。⑤淋巴细胞大多呈阴性反应，少数呈弱阳性反应；浆细胞一般为阴性。
3．临床意义
（1）红细胞系统：①红血病或红白血病、缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血（又称地中海贫血）以及骨髓增生异常综合征时，幼红细胞可呈阳性反应。②巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血和白血病等疾病时，幼红细胞为阴性反应。
（2）白细胞系统：①急性淋巴细胞白血病时，白血病性原始淋巴细胞的阳性反应物质为红色块状或粗颗粒状，底色不红。②急性粒细胞白血病时，白血病性原始粒细胞的阳性反应物质呈均匀分布的红色或红色细颗粒状。③急性单核细胞白血病时，白血病性原始单核细胞的阳性反应物质呈红色细颗粒状，弥散分布。
（3）其他细胞：①帮助鉴别不典型巨核细胞和霍奇金细胞或Reed－Sternberg细胞，前者呈强阳性反应，后者呈弱阳性或阴性反应。②帮助鉴别戈谢细胞和尼曼－匹克细胞，前者呈强阳性反应，后者是弱阳性反应。③帮助鉴别白血病细胞和腺癌骨髓转移的腺癌细胞，后者呈强阳性反应。
（三）碱性磷酸酶染色
1．原理（偶氮偶联法） 血细胞内的碱性磷酸酶（NAP）在pH 9．4～9．6的条件下将基质液中的α－磷酸萘酚钠水解，产生α－萘酚与重氮盐偶联形成不溶性灰黑色沉淀，定位于酶活性所在之处。①胞质无灰褐色沉淀为“－”。②胞质出现灰褐色沉淀为“＋”。③胞质深褐色沉淀为“
”。④胞质基本充满棕黑色颗粒状沉淀，但密度较低为“
”。⑤胞质全被深黑色团块沉淀所充满，密度高为“
”。
2．正常血细胞的染色反应 碱性磷酸酶主要存在于成熟中性粒细胞，除巨噬细胞可呈阳性反应外，其他血细胞均呈阴性反应。
3．临床意义
（1）生理变化：NAP活性可因年龄、性别、应激状态、月经周期、妊娠及分娩等因素有一定的生理性变化。
（2）病理性变化：①感染：在细菌性感染时NAP积分增高，病毒性感染时，NAP积分值一般无明显变化。②血液病：慢性粒细胞白血病的NAP积分值明显减低，常为“0”；类白血病反应时的NAP积分值明显增高，中性杆状核粒细胞的碱性磷酸酶活性增强；急性粒细胞白血病时NAP积分值减低。
（四）氯乙酸AS－D萘酚酯酶染色
1．原理 血细胞内的氯乙酸AS－D萘酚酯酶将基质液中的氯乙酸AS－D萘酚水解，产生萘酚AS－D，进而与基质液中的坚牢蓝GBC偶联，形成不溶性红色沉淀，定位于胞质内。
2．正常血细胞的染色反应 ①粒细胞系统：原粒细胞为阴性或弱阳性反应，自早幼粒细胞至成熟中性粒细胞均为阳性反应；嗜酸性粒细胞为阴性或弱阳性反应，嗜碱性粒细胞为阳性反应。②其他血细胞：单核细胞为阴性反应，个别可呈弱阳性反应。淋巴细胞、浆细胞、幼红细胞和血小板均呈阴性反应。
3．临床意义 鉴别急性白血病的类型。①急性粒细胞白血病时，白血病性原始粒细胞可出现阳性反应。②急性单核细胞白血病及急性淋巴细胞白血病时，白血病细胞均呈阴性反应。③急性粒－单核细胞白血病时，原粒和早幼粒细胞呈阳性反应，原始单核和幼单核细胞呈阴性反应。
（五）α－醋酸萘酚酯酶染色
1．原理 血细胞内的α－醋酸萘酚酯酶（α－NAE）将基质液中的α－醋酸萘酚水解，产生α－萘酚，萘酚再与重氮染料偶联，形成不溶性灰黑色或棕黑色沉淀，定位于胞质内。
2．正常血细胞的染色反应 ①原单核细胞为阴性或弱阳性反应，幼单核细胞和单核细胞呈阳性反应，单核系细胞的阳性反应可被氟化钠抑制。②粒细胞系统和淋巴细胞系统一般为阴性或弱阳性反应，且阳性反应不能被氟化钠抑制。③幼红细胞为阴性或弱阳性，阳性反应不被氟化钠抑制。④巨核细胞和血小板呈阳性，阳性反应不被氟化钠抑制。
3．临床意义 α－NAE染色主要用于鉴别急性白血病类型：①急性单核细胞白血病细胞呈强阳性反应，单核细胞中的酶活性可被氟化钠抑制。②急性粒细胞白血病时，原粒细胞呈阴性或个别阳性反应，此阳性反应不被氟化钠抑制。③急性早幼粒细胞白血病时，早幼粒细胞呈强阳性，阳性反应不被氟化钠抑制。④急性淋巴细胞白血病时，白血病原始淋巴细胞为阴性反应，有时原始淋巴细胞可出现阳性反应。⑤急性粒－单核细胞白血病时，部分原始白血病细胞呈阳性反应，并能被氟化钠抑制。
（六）醋酸AS－D萘酚酯酶染色
1．原理 血细胞内醋酸AS－D萘酚酯酶（AS－D NAE）将基质液中的醋酸AS－D萘酚水解，产生AS－D萘酚，进而与基质液中的重氮盐偶联，形成不溶性有色沉淀，定位于细胞质内酶所在的部位。
2．正常血细胞的染色反应 ①粒细胞系统：原粒细胞为阴性或阳性反应，自早幼粒细胞至成熟中性粒细胞均为阳性反应，此反应不被氟化钠抑制。②单核细胞系统：原始单核细胞为阴性或阳性反应，幼单核细胞和单核细胞均为阳性反应，此反应能被氟化钠抑制。③淋巴细胞：淋巴细胞呈弱阳性反应，此反应不被氟化钠抑制。④红细胞系统：早期幼红细胞可呈阳性反应，随细胞的成熟阳性反应程度逐渐减弱，此反应不被氟化钠抑制。⑤巨核细胞和血小板：为阳性反应。
3．临床意义 帮助鉴别急性白血病的类型。①急性粒细胞白血病时，白血病原始粒细胞呈阳性反应，此反应不被氯化钠抑制。②急性单核细胞白血病时，白血病原始单核细胞呈阳性反应，幼单核细胞和单核细胞为阳性反应，此反应被氯化钠抑制。③急性粒－单核细胞白血病时，部分白血病细胞的阳性反应可被氟化钠抑制，部分不被氯化钠抑制。
（七）碱性α－丁酸萘酚酯酶染色
1．原理 碱性条件下，血细胞内的α－丁酸萘酚酯酶（α－NBE）水解基质液中的α－丁酸萘酚，释放α－萘酚与基质液中的重氮盐偶联成不溶性的有色沉淀。
2．正常血细胞的染色反应 ①粒细胞系统中各期细胞呈阴性反应。②原单细胞依分化程度呈阴性或阳性反应，幼稚和成熟单核细胞呈阳性，此反应能被氟化钠抑制。③T淋巴细胞呈阳性，B淋巴细胞呈阴性。④巨核细胞、幼红细胞、浆细胞呈阴性或弱阳性，组织细胞也可呈阳性反应，但不被氟化钠抑制。
3．临床意义 用于鉴别急性白血病的类型：①急性单核细胞白血病时，单核系细胞呈阳性反应，此反应能被氟化钠抑制。②急性粒细胞白血病、急性早幼粒细胞白血病、急性淋巴细胞白血病时，白血病细胞呈阴性反应。③急性粒单细胞白血病时，部分白血病细胞呈阳性反应，部分白血病细胞呈阴性反应。
（八）酸性磷酸酶染色
1．原理 血细胞内的酸性磷酸酶在酸性条件下，将基质中的磷酸萘酚AS－BI水解，释放萘酚AS－BI，萘酚AS－BI与六偶氮副品红偶联，形成不溶性红色沉淀。
2．正常血细胞的染色反应 粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、巨核细胞、血小板、浆细胞、巨噬细胞呈阳性。
3．临床意义 ①帮助鉴别戈谢细胞和尼曼－匹克细胞，前者酸性磷酸酶染色为阳性反应，后者为阴性。②帮助诊断多毛细胞白血病：多毛细胞白血病时多毛细胞、淋巴肉瘤细胞和慢性淋巴细胞白血病的淋巴细胞的酸性磷酸酶染色都为阳性，前者耐L－酒石酸的抑制作用，后两者可被L－酒石酸抑制。③T淋巴细胞呈阳性反应，而B淋巴细胞为阴性反应。
（九）铁染色
1．原理 细胞外含铁血黄素和幼红细胞内的铁与酸性亚铁氰化钾发生普鲁士蓝反应，形成蓝色的亚铁氰化铁沉淀，定位于含铁的部位。结果判断：①细胞外铁：存在于骨髓小粒中，铁染色可呈弥散蓝色、颗粒状、小珠状或块状，根据其存在方式及数量分为
②细胞内铁：观察100个中幼红细胞和晚幼红细胞计算出铁粒幼红细胞的百分比。铁粒幼红细胞是指胞质中出现蓝色铁颗粒的幼红细胞，根据蓝色铁颗粒多少、粗细分为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型及环形铁粒幼红细胞。环形铁粒幼红细胞是指幼红细胞胞质内蓝色在6颗以上，围绕核周1／2以上者。成熟红细胞中出现铁颗粒称为铁粒红细胞。
2．正常血细胞染色反应 细胞外铁为
铁粒幼红细胞阳性率19%～44%，以Ⅰ型多见，少数为Ⅱ型。
3．临床意义 主要用于缺铁性贫血和铁粒幼细胞贫血的诊断。
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