一、类风湿因子
类风湿因子（rheumatoid factor，RF）是指抗人或动物IgG分子Fc片段上抗原决定簇的特异抗体，由于首先发现于RA患者并在RA患者血清中滴度较高且持续时间较长，故称之为RF。常见的RF有IgM－RF、IgG－RF、IgA－RF。
血清中大部分RF或以自由形式存在，或与IgG分子结合形成可解离性不稳定免疫复合物，但相当一部分高亲和力RF，一旦合成分泌后，即与IgG分子结合形成稳定免疫复合物，或沉积于组织或被网状内皮系统清除，因而各种检测结果不能准确反映患者RF合成情况。部分RA患者，尤其幼年RA其常规检测阴性，但凝胶过滤或酸解离患者血清后，再检测可测出RF，即隐性RF（hidden RF）。RF常用检测方法包括凝集试验（乳胶凝集试验）、浊度散射比浊法、酶联免疫吸附法（ELISA）。凝集试验仅能检测IgM－RF；而浊度散射比浊法可定量检测RF，但不能分型；ELISA法可检测出IgM型－RF、IgG型－RF和IgA型－RF。
【正常值】
凝集试验：阳性血清滴度大于1∶32；浊度散射比浊法：阳性值大于20IU／ml；ELISA法：根据结合RF的标记抗体量，推算各型RF血清含量（mg／ml）。
【处理要点】
1．结合临床明确RF阳性的临床意义。
2．如果高度提示为RA，注意CRP、ESR的检测，明确RA目前的炎症程度。
3．RF作为一自身抗体如果阳性，根据临床可进一步检测其他自身抗体（如ANA等）。
二、抗核抗体
抗核抗体（antinuclear antibody ANA）：是指抗细胞各种核抗原成分抗体的总称。靶抗原分布由传统的细胞核扩展到整个细胞包括细胞核、细胞质、细胞骨架等。靶抗原成分包括DNA、RNA、蛋白、蛋白核酸复合物。在临床上，ANA检测实际上是指总抗核抗体的检测，间接免疫荧光法检测。
【正常参考范围】
多数实验室ANA阳性滴度为1∶40或1∶100以上（Hep－2细胞为底物片）。即血清1∶40或1∶100倍稀释，间接免疫荧光法显示荧光着色。报告ANA阳性结果时，注意ANA滴度和荧光图型。
【处理要点】
1．ANA检测作为总抗核抗体检测如果阳性，应进一步检测抗ENA抗体、抗ds－DNA抗体等。
2．ANA作为一自身抗体如果阳性，根据临床可进一步检测其他自身抗体，如抗平滑肌抗体、抗线粒体抗体、RF等。
三、抗DNA抗体
抗DNA抗体分为抗单链DNA（single stranded DNA，ss－DNA）抗体、抗双链DNA（double stranded DNA，ds－DNA）抗体。抗ss－DNA抗体靶抗原为核糖和脱氧核糖，反应位点在嘌呤及嘧啶碱基区；抗ds－DNA：抗体靶抗原为DNA双螺旋结构，反应位点在脱氧核糖磷酸框架上。其中抗ds－DNA抗体的临床意义较大。抗ds－DNA抗体检测方法包括间接免疫荧光法（ⅡF）、放射免疫分析法（Farr法）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、斑点金免疫渗滤法、免疫印记法。临床最常用方法为ⅡF，特异性强、简易方便，ⅡF法以马疫锥虫或短膜虫为底物，这些虫体细胞核和动基体为纯ds－DNA。
【阳性参考值】
参考范围根据实验方法和所用试剂盒不同而不同。ⅡF法：抗ds－DNA抗体阳性滴度一般为＞1∶20；Farr法阳性结合率大于20%；ELISA法：参考值按试剂盒说明结合正常人测定结果规定界限值；斑点金免疫渗滤法阳性结果为线和斑点均出现粉红色。
【临床意义】
1．抗ds－DNA抗体主要见于系统性红斑狼疮，是其特异性抗体，是SLE诊断标准之一，抗ds－DNA抗体诊断SLE的特异性为90%，敏感性为70%。
2．抗ds－DNA抗体也见于其他结缔组织病，如干燥综合征、混合性结缔组织病，但阳性率低于10%、抗体滴度低，一般认为是这些疾病与SLE重叠。
3．抗ds－DNA抗体与狼疮肾炎相关。
4．抗ds－DNA抗体水平也是SLE病情活动指标之一，用于判断SLE病情活动以及药物治疗效果。
5．抗ss－DNA抗体见于多种风湿性疾病，尤其是药物狼疮阳性率较高，甚至正常老年人亦可出现，临床无太大实用价值。
四、抗ENA抗体
ENA为酸性核蛋白抗原，可溶于生理盐水或磷酸缓冲液，故称为可提取性核抗原（extractable nuclear antigen，ENA）。抗ENA抗体包括抗Sm抗体、抗RNP抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗Jo－1抗体、抗Scl－70抗体等。目前抗ENA抗体检测方法包括对流免疫电泳、免疫双扩散、免疫印迹。
【阳性参考】
对流免疫电泳法：在琼脂介质板中形成沉淀线，抗ENA抗体阳性；免疫双扩散：待测血清与标准血清形成的沉淀线融合，说明待测血清抗体与标准血清抗体相同。免疫印迹：纤维膜条上出现显色蛋白带，提示对应抗体阳性。
五、抗中性粒细胞胞浆抗体
抗中性粒细胞胞浆抗体（anti－neutrophi cytoplasmic antibody，ANCA）是一种以中性粒细胞胞浆成分为靶抗原的自身抗体。ANCA的靶抗原蛋白（蛋白酶－3、髓过氧化酶、其他）位于中性粒细胞初级颗粒（嗜天青颗粒）和次级颗粒（特异性颗粒）中。临床上常用的ANCA检测方法为ⅡF和ELISA，ⅡF法对ANCA进行总体检测与分型，准确测定ANCA对应的靶抗原，需进行ELISA检测。蛋白酶－3（Pro－3）是C－ANCA主要抗原蛋白，髓过氧化酶（MPO）为PANCA的主要抗原蛋白，ANCA靶抗原还可为中性粒细胞的其他组分，如杀菌通透性增强蛋白、弹性蛋白酶、溶菌酶、乳铁蛋白。
【正常参考范围】
ⅡF法以正常人中性粒细胞为底物，ANCA阳性血清显示3种荧光图型：胞浆型（C－ANCA）显示中性粒细胞胞浆弥漫性细颗粒荧光染色；核周型（P－ANCA）显示中性粒细胞核周围荧光染色；非典型（a－ANCA）显示胞浆和核周均呈荧光染色。ELISA法阳性参考按试剂盒说明。
六、抗磷脂抗体
抗磷脂抗体（anti－phospholipid antibody，Apa）是一组与含有磷脂结构多种抗原物质发生反应的抗体。抗磷脂抗体检测方法包括：①ELISA法检测抗心磷脂抗体（aCL）；②部分凝血活酶试验检测狼疮抗凝物质；③梅毒血清学凝集试验。目前临床上主要是抗心磷脂抗体检测，ELISA检测aCL可检测出三型aCL，即IgM－aCL、IgG－aCL、IgA－aCL。
【正常参考值】
ELISA法：酶标仪检测，以492nm波长检测吸光度，以一组阴性标本的吸光度平均值除以测定标本吸光度，≥2．1为阳性。
（王吉波）
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