蛋白质的核酸片段是什么

紫外光谱吸收法测定蛋白质含量是将蛋白质溶液直接在紫外分光光度计中测定的方法，不需要任何试剂，操作很简便，而且样品可以回收。

1. 原理

蛋白质溶液在波长280nm附近有强烈的吸收，这是由于蛋白质中酪氨酸、色氨酸残基而引起的，所以光密度受这两种氨基酸含量的支配。另外核蛋白或提取过程中杂有的核酸对测定结果引起极大误差，其最大吸收峰在260nm。所以同时测定280nm及260nm两种波长的吸光度，通过计算可得较为准确的蛋白质含量。

2. 分析步骤

将待测蛋白质溶液适当稀释K倍，在紫外分光度计中分别测定样品在10mm光径石英比色皿中，分别在280nm及260nm两种波长下的吸光度值A280和A260。

3. 分析结果的表述

①当蛋白样品的吸光值比值A280/A260约为1.8，可用下面的公式进行计算:

蛋白质浓度(mg/m L) =(1.45A280-0．74A260) ×K

②也可以先计算出A280/A260的比值后从表9-5中查出校正因子“F”值，由下面的经验公式计算出溶液的蛋白质浓度。同时从表9-5中还可以查出样品中混杂的核酸的百分含量:

蛋白质浓度(mg/m L) =F×A280×K

表9－5 吸光值比值(A280/A260)的校正因子“F”值

注: 一般纯净蛋白质的吸光值比值A280/A260约为1．8，而核酸A280/A260的比值约为0.5。

4. 说明与注意事项

本方法操作简便，样品溶液可回收，同时可估计核酸含量。但核酸含量小于20%或溶液混浊、则测定结果误差较大。在使用上表和公式计算时也应注意各种蛋白质和各种核酸在280nm及260nm处的光吸收值也不尽相同，故计算结果有一定误差。