发状念珠藻荚膜多糖的提取

7．2．3　发状念珠藻荚膜多糖的提取

荚膜多糖附着于发状念珠藻细胞表面，并不分散到细胞培养液中。对于荚膜多糖可采用热水浸提法使其溶于水中，再采用乙醇沉淀法进行提取。

7．2．3．1　料水比对荚膜多糖提取的影响

称取约100mg重的发状念珠藻干细胞数份，研磨，过20目筛，加入一定体积的蒸馏水，使其料水比分别为1∶100、1∶150、1∶200和 1∶250，80℃下浸提7小时，乙醇沉淀法提取水溶性多糖并计算多糖提取产率的结果如图7－7。

图7－8　料水比对多糖提取的影响

当料水比为1∶100时，荚膜多糖的提取产率为3．1mg／100mg。当料水比提高至1∶150时，产率增加为5．4mg／100mg，此后再继续增大料水比，提取产率之间没有显著性差异（P＞0．05）。由于料水比越大，后续工艺操作如浓缩、有机溶剂沉淀等所耗费的原料、能源均增大，致使提取成本上升，因此提取发状念珠藻荚膜多糖时1∶150的料水比较为合理。

7．2．3．2　浸提时间对多糖提取的影响

称取约100mg重的发状念珠藻干细胞数份，研磨，过20目筛，料水比1∶150，80℃下分别浸提3小时、4小时、5小时、6小时和7小时，乙醇沉淀法提取水溶性多糖并计算多糖产率的结果如图7－8。

随着浸提时间的延长，发状念珠藻多糖产率随之提高。80℃下浸提3小时，多糖产率仅为2．2%，当浸提时间延长到7小时时，多糖产率上升至5．7%。不同浸提时间多糖产率之间的差异均极显著（P＜0．01），表明浸提时间对多糖产率影响极为显著。

图7－9　浸提时间对多糖提取的影响

7．2．3．3　不同浸提温度对多糖提取的影响

称取约100mg重的发状念珠藻干细胞数份，研磨，过20目筛，料水比为1∶150，分别在40℃、50℃、60℃、70℃和80℃下浸提6小时，乙醇沉淀法提取水溶性多糖并计算多糖产率的结果如图7－9。

图7－10　浸提温度对多糖提取的影响

浸提温度对发状念珠藻多糖产率也有较大的影响。许多多糖都具有不溶于冷水、而溶于热水的性质。当浸提温度较低时，多糖产率也较低。当浸提温度为40℃和50℃时，浸提6小时多糖产率仅为1．1%和1．4%，当浸提温度上升至80℃时，多糖产率提高至5．3%，若浸提温度继续升高，多糖产率还会上升，但考虑到浸提温度过高会引起多糖结构的破坏，故发状念珠藻干细胞的最佳浸提温度应为80℃。