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无标记基因的植物转化

时间:2022-10-06 百科知识 版权反馈
【摘要】:如果在植物遗传转化过程中,可以不使用选择标记基因就能获得含目的基因的转基因植株,是最经济和最理想的方法。De Vetten等报道,成功验证了这一假设,提供了不需要选择标记基因的植物转化系统。再生芽培养成小植株后进行PCR检测,从非转化植株中筛选得到转化植株,转化效率为1%~5%。PCR检测为阳性的转化植株,其中45%在表型上表现出目的基因的性状。

如果在植物遗传转化过程中,可以不使用选择标记基因就能获得含目的基因的转基因植株,是最经济和最理想的方法。De Vetten等(2003)报道,成功验证了这一假设,提供了不需要选择标记基因的植物转化系统。致病性强的农杆菌(A.tumefaciens)AGL0菌株由于包含来源于超强毒株A.tumefaciens A281的质粒p TiBo542的Ti区的DNA片段,因此具有较高转化效率。De Vetten等(2003)利用AGL0菌株侵染马铃薯外植体,每个外植体可以产生1~2个再生芽。再生芽培养成小植株后进行PCR检测,从非转化植株中筛选得到转化植株,转化效率为1%~5%。PCR检测为阳性的转化植株,其中45%在表型上表现出目的基因的性状。Ahmad等(2008)应用此无选择标记基因的转化系统,在氧化胁迫诱导启动子SWAP2驱动下,将超氧化物歧化酶(SOD)基因和抗坏血酸过氧化物酶(APX)基因导入马铃薯叶绿体中,得到无选择标记基因的抗氧化胁迫的转基因植株。

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