发状念珠藻细胞聚合体的形成

6．3．3　发状念珠藻细胞聚合体的形成

将在BG11培养基中培养20天的单体发状念珠藻细胞培养液在无菌条件下离心，收集细胞后加入新鲜的BG11培养基，调整细胞浓度为： A₇₅₀值等于0．2～0．3，光照静止培养，光照强度40μmol· m^－2· s^－1，光照周期14小时／24小时，光照时温度25℃，无光照时10℃。

收集得到发状念珠藻细胞绝大多数为有黏液包被的细胞团。随着培养时间的延长，细胞团内的细胞数量逐渐增多，群体变得致密（彩色插图13）。进一步培养，培养液中则出现肉眼可见的具有一定形状和结构的绿色小团块，称为细胞聚合体（彩色插图14）。细胞聚合体直径1～5mm，干燥后呈黑色。室温下连续干燥24小时后重新湿润，聚合体仍然能恢复正常的结构及细胞形态，表明聚合体具有一定的抗干旱能力。

细胞聚合体可通过自身的破裂进行繁殖，由一个繁殖为两个或多个。聚合体生长到一定阶段，可能是由于群体内生长速度的差异而出现生长不均匀的现象，表现为聚合体外观颜色深浅的差异，这种差异在体视显微镜下可以清楚的观察到（彩色插图14）。聚合体在浅色部位断裂为两个或数个，使聚合数量增加。

细胞聚合体在60天的培养周期中没有发生进一步的形态分化，每60天更换新鲜培养基，聚合体可不断生长和繁殖，如不更换培养基连续培养，则聚合体从边缘开始失绿，最终整个聚合体颜色变白死亡。试验结果表明，在液体培养条件下发状念珠藻细胞可以发生聚集并形成具有一定形态结构的聚合体，但未能形成类似天然发状念珠藻的丝状体结构。

液体培养条件下，在发状念珠藻细胞团基础上形成的细胞聚合体具有与天然发状念珠藻相似的结构和特性，但其形态与天然发状念珠藻差异很大。作为生长在干旱地区的陆生蓝细菌，生长地较大的温差、周期性的干燥和强烈光照等条件可能对发状念珠藻的形态建成有重要影响，在这种条件下，细胞生长缓慢，而作为抗性物质的胞外分泌物则大量生成，这样可以保证细胞生长的空间使其保持藻丝状态，同时贴附于地面的生长方式有利于发状念珠藻沿某一方向生长而成为丝状。而液体培养条件下，培养液中均一的生长环境使得发状念珠藻细胞易于聚集成为团状，这与丝状微生物如霉菌和放线菌在液体培养基中的生长状态类似。