选择方法的依据和思路

二、选择方法的依据和思路

植物成分含量测定常用方法有分光光度法、薄层扫描法、气相色谱法及高效液相色谱法。总组分测定一般用分光光度法。进行定量分析的成分最好是有效成分或指标性成分，如果成分类别清楚，也可对某类成分如总生物碱、总黄酮、总蒽醌等进行测定，但必须无干扰才可进行。测定方法多用分光光度法。测定时，不宜采用总组分为对照品，因总组分复杂，各成分比例不稳定，不同批次的总组分难以保持一致，从而使含量测定结果不稳定。可选用同系物之一的化学单体为对照品并以其计算，并且要求对照品溶液与供试品溶液最大吸收波长必须一致，否则方法不能成立。如测定人参总皂苷，以人参皂苷Rg1作对照品并计算。对于测定干扰难以克服或含量极低无法测定含量的样品，也可选择适宜的溶剂进行浸出物测定，如挥发性成分可按挥发性醚浸出物测定。对于所测成分本身或显色后在可见光区有明显吸收，可用比色法，如黄酮类化合物能与铝盐作用，蒽醌类成分能与碱液显色，生物碱可与酸性染料显色等。如果所测成分在紫外区或荧光区有吸收，可直接用紫外分光光度法或荧光法测定。对于单体成分的含量一般用薄层扫描法、气相色谱法及高效液相色谱法测定。挥发油及挥发性成分如冰片、薄荷脑、麝香酮、樟脑、厚朴酚、柠檬烯等可以用气相色谱法定量，其他类成分如一些生物碱类、脂肪酸类、内酯类、糖类也可用气相色谱法直接定量或制备成可挥发的衍生物后再用气相色谱法定量。

薄层扫描法及薄层—分光光度法虽然常用作单体成分定量，但由于植物成分复杂，干扰比较大，薄层层析常难以达到完全分离的效果；再者薄层定量误差大，灵敏度较低，故一般在无液相色谱或液相色谱解决不了问题时常用此法。高效液相色谱法对样品的要求是能制备成适当的溶液，不需气化，加之其具有分离效果好、操作条件易稳定、流动相选择余地大等优点，使得其成为目前植物成分分析中应用最广泛的方法。常用的色谱柱填充剂有硅胶，用于正相色谱，一般用于分析极性小的成分；化合键合相，其中最常用的十八烷基硅烷键合硅胶可用于反相色谱，常用于分析极性较大的成分。检测器多用紫外检测器。对于没有紫外吸收的成分，可用新兴的检测器——蒸发光散射检测器（ELSD）。